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詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JC-10 Apoptosis Detection Kit | 10T|20T|50T|100T | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒可應用于細胞、組織或純化的線粒體膜電位檢測。大量的研究表明線粒體與細胞凋亡密切相關，其中線粒體跨膜電位（△?）的破壞，被認為是細胞凋亡級聯(lián)反應過程中最早發(fā)生的事件之一，它發(fā)生在細胞核凋亡特征（染色質濃縮、DNA斷裂）出現之前，一旦線粒體跨膜電位崩潰，則細胞凋亡不可逆轉。 本試劑盒采用JC-10 (Enhanced JC-1)一種陽離子脂質熒光染料作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-100 可以選擇性地進入線粒體，且由于膜電位的增加，其顏色會發(fā)生從綠色到橙色的可逆性改變。這種特性是由于JC-100 聚合物的可逆結構，在膜極化條件下，它的發(fā)射光由520nm(JC-100 單體發(fā)射光)轉移到570nm (J-聚合體發(fā)射光)。當在490nm 處激發(fā)時，JC-100 發(fā)生從綠色到橙綠色的可逆改變。這兩種顏色都可以被流式細胞儀上裝好的一般濾光器檢測到，因此綠色發(fā)射光可以通過熒光通道1（FL1）進行分析，橙綠色發(fā)射光可以通過熒光通道2（FL2）進行分析。它除了有潛力用于流式細胞術，也可以用于熒光成像分析。 |
注意事項
1. 微量試劑取用前請離心集液。
2. JC-10 避光保存及使用。
3. 細胞培養(yǎng)至匯合度80-90%，收集細胞量在1×106/Test。
4. 對PH 變化過于敏感的細胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌，或延長觀測時間。
5. 流式細胞儀檢測線粒體膜電位變化受到多種因素的影響，因誘導劑、細胞株類型，作用時間的不同而熒光強度比例都有不同，因此沒有通用標準的補償設門指南，因此每個試驗需設陰性及陽性對照組進行熒光補償及設門。
6. 組織需先制備單細胞懸液或提取純化線粒體后方可進行檢測，可選用我司細胞懸液制備試劑盒或線粒體提取試劑盒。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa試劑盒英文名稱：α2-AP ELISA Kitβ-乳球蛋白抗體包裝5g
α1微球蛋白(α1-MG)elisa試劑盒英文名稱：α1-MG ELISA Kit緩激肽B2受體抗體包裝1g
α1性糖蛋白(α1-AGP)elisa試劑盒英文名稱：α1-AGP ELISA Kit丁酰堿酯酶抗體(N端)包裝25g
α1抗胰白酶(AACT)elisa試劑盒英文名稱：AACT ELISA Kit丁酰堿酯酶抗體(C端)包裝5g
α1干擾素(IFN-α1)elisa試劑盒英文名稱：IFN-α1 ELISA KitBLAME抗體包裝10MG
Wnt-3a蛋白(WNT3A)elisa試劑盒英文名稱：WNT3A ELISA Kit巴曲霉素單克隆抗體包裝25g
Wnt-10b蛋白(WNT10B)elisa試劑盒英文名稱：WNT10B ELISA Kit蛇巴曲酶抗體包裝5g
V-Ha-Ras肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)elisa試劑盒英文名稱：HRAS ELISA Kit溴脫氧尿苷抗體包裝1g
T細胞活化連接蛋白(LAT)elisa試劑盒英文名稱：LAT ELISA Kit腫瘤/抗原2.2抗體包裝25g
T細胞表面糖蛋白CD3 epsilon鏈(CD3E/T3E)elisa試劑盒英文名稱：CD3E/T3E ELISA Kit腫瘤/抗原2.3抗體包裝5g
T細胞白血病同源盒蛋白1(Tlx1/Hox11/Tlx-1)elisa試劑盒英文名稱：Tlx1/Hox11/Tlx-1 ELISA Kit腫瘤/抗原2.4抗體包裝1g
Toll樣受體9(TLR-9/CD289)elisa試劑盒英文名稱：TLR-9/CD289 ELISA Kit腦鈉素/利鈉肽抗體包裝5g
Toll樣受體7(TLR7)elisa試劑盒英文名稱：TLR7 ELISA KitB Raf抗體包裝1g
Toll樣受體5(TLR-5)elisa試劑盒英文名稱：TLR-5 ELISA Kit癌易感基因1抗體包裝5g
TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)elisa試劑盒英文名稱：TIEG1 ELISA Kit癌易感基因2抗體包裝25g
磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗體基質衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)MHY1485 是一種有效的滲透性 mTOR 激活劑，靶向 mTOR 的 ATP 結構域。MHY 1485 通過抑制自噬體和溶酶體之間的
細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10)硬脂鋅
其他 硬酯鋅；十八鋅；脂蠟鋅；十八鋅鹽；硬脂鋅鹽
英文名稱： Stearic acid zinc salt
其他英文名稱： Zinc stearate；Octadecanoic acid zinc salt
產品規(guī)格： CP，13.5-15.5%
包裝：500克
CAS號：557-05-1
C36H70O4Zn=632.33
級別：CP
含量(以ZnO計)：13.5～15.5%
度(以H+計)：≤1.74mmol/100g
水溶物：≤0.5%
干燥失重：≤1.0%
氯化物：≤0.2%
硫鹽：≤0.2%
性狀：細軟粉末。微有刺激性氣味。有滑膩感。中性反應。 能被稀所分解。溶于、熱乙和松節(jié)油等有機溶劑，不溶于水、乙。相對密度 1.095。熔點 約120℃。小致死量(大鼠，腹腔)250mg/kg。商品常為硬脂鋅、棕櫚鋅和適量氧化鋅的混合物。
用途：生化研究?？古菽瓌?。光和熱穩(wěn)定劑。油漆平光劑和研磨劑。橡膠干燥潤滑劑和隔離劑。塑料脫模劑?；炷?、褐塊石棉、紙、織物的防水劑
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