培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: 肥大細(xì)胞脫顆粒染色 注意事項(xiàng): 肥大細(xì)胞呈紫色至深紫色,彈力纖維呈紫色,紅細(xì)胞呈橙黃色,其余組織呈淡黃色,其他細(xì)胞多不著色。
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儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
桑辛;桑根皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)胰高血糖樣肽2受體抗體包裝1g
桑葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Methyliminodiacetic Acid生長(zhǎng)休止特定蛋白1抗體包裝5g
桑枝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nitrilotriacetic Acid Disodium Saltγ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈1抗體包裝25g
沙蟾精-3-辛二半酯英文名稱: N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acidγ1基丁受體α5/GABRα5抗體包裝5g
沙棘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic AcidG蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝200mg
沙棘膏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體包裝100g
沙苑子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethylsulfonazo IIIG蛋白偶聯(lián)受體48抗體包裝25g
沙苑子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulfonazo III 糖基轉(zhuǎn)移GLT8D2抗體包裝500g
沙苑子苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate高爾基體外周膜蛋白p65抗體包裝100g
砂仁(陽(yáng)春砂)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,2'-Dihydroxyazobenzene核因子GCNF/維受體相關(guān)受體抗體包裝500g
山茶甙A英文名稱: StilbazoG蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體包裝5g
山茶甙B英文名稱: Lumogallion 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝100mg
山茶苷A英文名稱: Disodium Bathocuproinedisulfonate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝500mg
山豆根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝1g
山風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bathocuproine (purified by sublimation)轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%腦腸肽試劑盒3-O-咖啡??鼘?3-O-caffe
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品囊蟲病抗體試劑盒輪環(huán)藤寧;Cyclen
靈芝(赤芝,紅靈芝)Ganoderma│lucidium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31難辨梭狀芽孢桿菌B試劑盒龍膽山酚;Bellidifolin
肥大細(xì)胞染色液(醛品紅-橙黃G法)兔肌動(dòng)蛋白
英文名稱:Actin from rabbit muscle
產(chǎn)品規(guī)格:BR,85%
包裝:1毫克/5毫克/25毫克
CAS號(hào):51005-14-2
分子量:43 kDa
含量:≥85% (SDS-PAGE)
蛋白含量:≥80%(biuret)
性狀:普遍存在于各類細(xì)胞的細(xì)胞核中。肌肉結(jié)構(gòu)蛋白的一種,肌原纖維細(xì)絲中的主要成分。它是由一條多肽鏈組成。分子構(gòu)型呈球形,有方向性,一般稱球狀肌動(dòng)蛋白(G-肌動(dòng)蛋白);當(dāng)增加溶液的離子強(qiáng)度,在Mg2+存在下,許多個(gè)(300~400)G-肌動(dòng)蛋白按同一前后方向聚合成長(zhǎng)鏈,稱為纖維狀-肌動(dòng)蛋白(F-肌動(dòng)蛋白)。在肌原纖維細(xì)絲中,以兩條F-肌動(dòng)蛋白鏈相互盤繞成雙股螺旋
用途:生化研究。肌動(dòng)蛋白、肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白和肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白等蛋白共同參與了細(xì)胞核內(nèi)肌動(dòng)蛋白形式和功能的調(diào)節(jié),包括肌動(dòng)蛋白單體與聚合形式的轉(zhuǎn)換、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)調(diào)整、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、mRNA加工和運(yùn)輸?shù)仍S多重要生理功能。
保存:2~8℃