操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Hoechst33342染色液(含封片劑)
英文名稱:Hoechst33342 Staining Solution
產(chǎn)品規(guī)格:10ml
發(fā)貨周期:1~3天
用途:
細(xì)胞周期分析、活細(xì)胞染色等 注意事項(xiàng): Hoechst33342是一種熒光染料,可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)??芍苯佑糜诠潭?xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
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儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,6個(gè)月
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
南沙參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triflumuron磷化GADD153抗體包裝250mg
南山楂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PencycuronG蛋白αS抗體(鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白Gα s)包裝1g
南五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexythiazox solutionG蛋白β4抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基4包裝250mg
鬧羊花II英文名稱: Hexythiazox solutionG蛋白β2抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基2包裝1g
鬧羊花III英文名稱: Imazalil solutionG蛋白γ2抗體/鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白γ2抗體包裝5g
鬧羊花V英文名稱: Siduron磷化糖原合激3β抗體包裝100g
鬧洋花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SimazineG蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體包裝25g
擬人參皂苷F11(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Simazine solution己糖6磷脫氫抗體包裝500g
擬人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phoxim solutionG蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體包裝5g
擬人參皂苷RT5(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phoxim solution腸高血糖相關(guān)肽抗體包裝100g
鳥(niǎo)苷英文名稱: Pirimicarb solution葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10抗體包裝25g
尿囊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pyrazosulfuron腸高血糖相關(guān)肽抗體包裝500g
檸檬苦,黃柏內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取)英文名稱: PretilachlorG蛋白偶聯(lián)受體120抗體包裝1g
檸檬苦;吳茱萸內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取)英文名稱: Pretilachlor solutionG蛋白偶聯(lián)受體40抗體包裝25g
牛白藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propoxur solution20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框100抗體包裝5g
克魯弗酵母克魯弗變種Saccharomyces│kluyveri var. kluyveri 質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測(cè)定皮膚淋巴相關(guān)抗原試劑盒木犀草苷;Cynaroside
枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus│subtilis subsp. subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,JP16皮膚蛋白試劑盒迷迭香;Rosmarinic acid
: Yt17資源名稱: 假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)皮動(dòng)蛋白試劑盒牡荊;Vitexin
Hoechst33342染色液(含封片劑)維生B12
其他維生乙12;氰鈷胺;維他命B12;氰基鈷胺;鈷胺
英文名稱:VB12
其他英文名稱:Cyanocobalamin;Vitamin B12;Cyanocob(III)alamin;α-(5,6-Dimethylbenzimidazolyl)cyanocobamide
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:1克/5克/25克
CAS號(hào):68-19-9
C63H88CoN14O14P=1355.38
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
鑒別:合格
干燥失重:≤12.0%
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
維生B6:≤0.5%
干燥失重:≤10.0%
重金屬:≤20ppm
PH(0.25%ag Solution):2.6~3.0
性狀:淡黃色或黃色粉末。熔點(diǎn)140~143℃。幾乎無(wú)氣味。無(wú)味。見(jiàn)光緩慢分解。易溶于甲、含水吡啶和稀堿液,微溶于水、乙、、和。水溶液在冷而避光處很穩(wěn)定,0℃時(shí)3周只分解2%~3%,如在室溫則分解較多。半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)5900mg/kg
用途:生化研究。孕甾特性的修飾。抑制劑
保存:2~8℃,避光