詳細介紹
小鼠腎小球系膜細胞;SV40MES13價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠腎小球系膜細胞;SV40MES13價格
形態(tài)特性 心肌成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 這株細胞的細胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動蛋白,在細胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。 有報道稱在1uM血管緊張素II存在下,它們會收縮。 細胞在軟瓊脂中形成克隆,SV40大T抗原陽性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,5%;14mM HEPES
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(27+5)
凍
小鼠腎小球系膜細胞;SV40MES13價格貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
小鼠腎小球系膜細胞;SV40MES13價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Plexin B1/Semaphorin receptor/FITC 熒光素標記神經(jīng)叢蛋白B1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
標準胎血清Multi-class antibodies規(guī)格: 200ml
人類狀瘤病毒抗體 Anti-HPV 0.1ml
Goat anti-Rabbit IgG whole serum 羊抗兔IgG抗血清 1ml
Fibronectin 英文名稱: 纖維連接蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-RCC1 (Ser11) 磷酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
標準胎血清Multi-class antibodies規(guī)格: 200ml
PR3Ab(Human Proteinase 3 Antibody) ELISA Kit 人蛋白酶3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-2 白細胞介素-2單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRP/MVP 肺耐藥相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit 人游離原卟啉 96T
phospho-c-Raf(Ser301) 英文名稱: 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.1ml
C15orf52 英文名稱: 15號染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml
Anti-IL-2 白細胞介素-2單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Synuclein mouse ELISA kit 小鼠突觸素 96T
phospho-PAK1 (Ser) 英文名稱: 磷酸化p21激活激酶1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-6 白介素6抗體 規(guī)格 0.1ml
KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人激肽釋放酶10Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
CD44v7 英文名稱: CD44V7抗體 0.1ml
Anti-NCOA2/KAT13C 核受體輔助激活蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠腎小球系膜細胞;SV40MES13價格C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增強子結合蛋白αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PDK1/PDPK1 3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HLA DMβ 組織相容性復合體β抗體 規(guī)格 0.1ml
BGP/Gehrelin ELISA Kit 大鼠腦腸肽 96T
Phospho-PRKACB(Thr198) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶C亞性抗體 0.1ml
CtIP 英文名稱: 視網(wǎng)膜母細胞瘤結合蛋白8抗體 0.2ml
Anti-PDK1/PDPK1 3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml