詳細介紹
細胞名稱 人正常陰道上皮細胞;HNVEC/HL-016培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
人正常陰道上皮細胞;HNVEC/HL-016培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線
人正常陰道上皮細胞;HNVEC/HL-016培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
人正常陰道上皮細胞;HNVEC/HL-016培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) /FITC 熒光素標記磷酸化β抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-dUTPase/FITC 熒光素標記抗脫氧尿嘧啶三磷酸核苷水解酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CXCL4/PF4 血小板因子4抗體 規(guī)格 0.1ml
Thyroxine Binding Globulin 甲狀腺素結合球蛋白抗原 0.5mg
C20orf19 英文名稱: 20號染色體開放閱讀框19抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh VWCE VWCE抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-dUTPase/FITC 熒光素標記抗脫氧尿嘧啶三磷酸核苷水解酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VEGF-C(Vascuoar endothelial growth factor-C) 血管內皮生長因子C型抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caspase-8 半胱氨酸蛋白酶8抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh P-CK/Cytokeratin AE1 + AE3 廣譜細胞角蛋白PCK抗體 規(guī)格 0.1ml
NTRK1 Kit Human 人 TrkA / NTRK1 ELISA配對抗體 ELISA
CABP4 英文名稱: 瞬時受體電位通道蛋白4抗體 0.2ml
CREB-1 英文名稱: 環(huán)腺苷酸應答元件結合蛋白抗體 0.1ml
Anti-Caspase-8 半胱氨酸蛋白酶8抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人絨毛膜生長素(Choriomammotropin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒,英文名:Aβ1-42 ELISA Kit人惡性腦腫瘤缺失蛋白1(DMBT1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠組織蛋白酶S(CTSS)ELISA試劑盒,英文名:CTSS ELISA KiISA Kit for Human Dynamin-2小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)ELISA試劑盒,英文名:IGFBP3 ELISA Kit人上皮細胞粘附分子(EPCAM)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠吻素受體(KISS1R)ELISA試劑盒,英文名:KISS1R ELISA KiISA Kit for Human Ferritin light chain小鼠神經營養(yǎng)因子3(NT3)ELISA試劑盒,英文名:NT3 ELISA Kit人成纖維細胞生長因子6(FGF-6)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠尿皮質素1(UCN1)ELISA試劑盒,英文名:UCN1 ELISA KiISA Kit for Human Glutathione peroxidase 2小鼠間隙連接蛋白43(CX43)ELISA試劑盒,英文名:CX43 ELISA Kit
人促腎上腺皮質激素釋放激素受體2(CRF-R2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)ELISA試劑盒,英文名:LOX-1 ELISA Kit人異質核糖核蛋白F (hnRNPF)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠骨成型蛋白7(BMP7)ELISA試劑盒,英文名:BMP7 ELISA KiISA Kit for Human Heat shock 70 kDa protein 1A/1B小鼠低氧誘導因子1α(HIF1α)ELISA試劑盒,英文名:HIF1α ELISA Kit人白介素7受體α亞基(IL-7RA)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠白介素5受體α(IL5Rα)ELISA試劑盒,英文名:IL5Rα ELISA KiISA Kit for Human Immunoglobulin J chain小鼠S100鈣結合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒,英文名:S100A11 ELISA Kit人Janus激酶3(JAK3)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒,英文名:CTXⅠ ELISA KiISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase LMTK3大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒,英文名:MUC5B ELISA Kit
兔抗人 IgG/FITC 0.2ml 綠色熒光,Dako公司
phospho-VAV1 (Tyr174) 英文名稱: 磷酸化鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-BAP1(Ser592) 磷酸化癌易感基因1抗體(人) 規(guī)格 0.1ml
MyD88 (myeloid differential protein-88) 髓樣分化蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Dispatched 英文名稱: 膜轉運蛋白DISPA抗體 0.2ml
Anti-Anthrax 抗體(采用活疫苗制備)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人正常陰道上皮細胞;HNVEC/HL-016培養(yǎng)CA(Mouse carbonic anhydrase) ELISA Kit 小鼠碳酸酐酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 熒光素標記壞死因子受體超家族成員13B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG 驢抗人IgG 規(guī)格 1mg
5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 兔子5羥色胺 96T
MLX 英文名稱: 轉化因子樣蛋白4抗體 0.2ml
ARSB 英文名稱: 芳基酯酶B抗體 0.2ml
Anti-TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 熒光素標記壞死因子受體超家族成員13B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml