詳細(xì)介紹
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)自于一個(gè)4周齡女性胚胎的正常肺組織,于1975年在中國(guó)醫(yī)學(xué)*昆明醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所建立;可作為轉(zhuǎn)染宿主,用于肺損傷或分化的研究。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17價(jià)格貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17價(jià)格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
BGP/Gehrelin ELISA Kit 大鼠腦腸肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Tap1/ABCB2 /FITC 熒光素標(biāo)記ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FLG 絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
CAM ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)素 96T
CAB39 英文名稱: 鈣結(jié)合蛋白39抗體 0.1ml
ABCF1 英文名稱: ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 0.1ml
Anti-Tap1/ABCB2 /FITC 熒光素標(biāo)記ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VEGF-A(Vascuoar endothelial growth factor A) 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caspase-7 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCK1 磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 規(guī)格 0.2ml
MCAM Kit Human 人 CD146 / MCAM / MUC18 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TPTE 英文名稱: /抗原44抗體 0.2ml
CSNK1G1 英文名稱: 酪蛋白激酶1γ1抗體 0.2ml
Anti-Caspase-7 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人葡糖神經(jīng)酰胺酶(Glucosylceramidase)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)ELISA試劑盒,英文名:Alk-Smase ELISA KiISA Kit for Human Uncharacterized protein C1orf106小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒,英文名:U-TSH ELISA KiISA Kit for Human Collagen alpha-1(X) chain小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒,英文名:IL-1α ELISA KiISA Kit for Human Collagen alpha-1(II) chain小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒,英文名:8-OHdG ELISA KiISA Kit for Human Dual oxidase 2小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員8(TNFRSF8)ELISA試劑盒,英文名:TNFRSF8 ELISA KiISA Kit for Human Extracellular matrix protein 1小鼠細(xì)胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)ELISA試劑盒,英文名:CYP3A4 ELISA KiISA Kit for Human Fc region of Immunoglobulin G小鼠溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)ELISA試劑盒,英文名:SLC30A10 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic小鼠骨鈣素(OC)ELISA試劑盒,英文名:OC ELISA KiISA Kit for Human Plaet glycoprotein Ib alpha chain小鼠精氨酸加壓素原(VP)ELISA試劑盒,英文名:VP ELISA KiISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase HACE1小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA試劑盒,英文名:EFNB2 ELISA KiISA Kit for Human Protein Red小鼠半乳凝素8(GAL8)ELISA試劑盒,英文名:GAL8 ELISA KiISA Kit for Human Interferon beta小鼠Gremlin小鼠1蛋白(GREM1)ELISA試劑盒,英文名:GREM1 ELISA KiISA Kit for Human Galectin-3-binding protein大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒,英文名:ACS ELISA Kit人特異性β1-糖蛋白3ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠Apelin(APLN)ELISA試劑盒,英文名:APLN ELISA Kit
兔抗馬IgG純化抗體 1mg/10mg 國(guó)產(chǎn)
YB1 英文名稱: y-盒結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf (Ser289) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DPY19L2 英文名稱: DPY19L2蛋白抗體 0.2ml
anti-14-3-3 14-3-3蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17價(jià)格Anti-Skp2/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
一氧化氮合成酶-2抗體 Anti-NOS-2/iNOS 0.1ml
5-HT/5 Hydroxy Tryptophan 英文名稱: 5羥色胺抗體 0.1ml
EME1 英文名稱: 減數(shù)分裂內(nèi)切酶EME1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser6) 磷酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml
BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg