詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:派琴蟲核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管
貨號:YS-01P6586
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
三特丁基膦 1.0 M in toluene常春藤皂元 分析標準品,≥98%人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)免疫試劑盒
噻吩-2,3-二甲 98%高三尖杉酯 分析標準品,≥98%人Prominin 2(PROM2)免疫試劑盒
alpha-三聯(lián)噻吩 99%哈巴俄甙 分析標準品,≥98%人Podocin 免疫試劑盒
三(二亞芐基酮)二鈀,加合物 98%大麥芽 分析標準品,≥99%人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成(PL7)免疫試劑盒
三(2-甲基)膦 97%豆腐果甙 分析標準品,≥98%人PL12抗體/抗氨酰tRNA合成(PL12/AlaRS)免疫試劑盒
四(三基膦)鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%異歐前胡 分析標準品,≥99%人PC4,SFRS1互動蛋白1(PSIP1)免疫試劑盒
2,2',7,7'-四溴-9,9'-螺二芴 98%鹽藥根 分析標準品,≥98%人P53抗體免疫試劑盒
2-乙?;?5-降烯 95%黨參炔 分析標準品,≥98%人P2蛋白抗體(IgM)免疫試劑盒
N-乙烯基咔唑 98%甘草 分析標準品,≥98%人P2蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒
4,5-雙二基膦-9,9-二甲基氧雜蒽 98%蒿本內(nèi)酯 分析標準品,≥90%人P27蛋白(P27)免疫試劑盒
2-氨基-4--6-甲氧基嘧啶 99%烏藥內(nèi)脂 分析標準品,≥98%人P0蛋白抗體(IgM)免疫試劑盒
2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶 98%鹽川芎 分析標準品,≥98%(HPLC)人P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒
3-氨基吡-2-羧 98%α-倒捻子 分析標準品,≥98%人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)免疫試劑盒
2-氨基-6- 98%羅漢果V 分析標準品,≥98%人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)免疫試劑盒
2-氨基-4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三 98%(-)-薄荷 分析標準品,≥99.5%人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG)免疫試劑盒
派琴蟲核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒,4-甲基-3,5-二甲基異噁唑22號染色體開放閱讀框36抗體
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒,2',5'-二乙酮補體組分1q子成分樣蛋白1抗體
大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA試劑盒,2',5'-二乙酮CD44抗體
大鼠端粒(TE)ELISA試劑盒,2',5'-二乙酮9號染色體開放閱讀框114抗體
雞白介4(IL-4)ELISA試劑盒,吡啶-2-CD8β鏈(CD8-β)抗體
嗜鹽菌選擇性瓊脂 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)2-氨基-4-吡啶6號染色體開放閱讀框1抗體
甲殼 Chitin2-氨基-4-吡啶γ晶狀體蛋白S/γS-crystallin抗體
人可溶性間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒,2-溴-6-氨基吡啶9號染色體開放閱讀框72抗體