詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數規(guī)格:
貨號:YS-01P6425
產品規(guī)格:48T 0.1PCR管
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
N-甲基嗎啉-N-氧化物 50%水溶液3-聯(lián) 98%兔子CD34分子(CD34)免疫試劑盒
β-巰基乙 生物技術級 (劇品)3,4-二甲氧基溴 98%兔子B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒
β-巰基乙 AR,99.0%(劇品)3,4-二溴 99%兔子8羥基脫氧鳥(8-OHdG)免疫試劑盒
β-巰基乙 CP,95.0%(劇品)4-芐氧基-2- 96%兔子6-酮前列腺F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒
鈦鋇 粉末, <2 μm, 99.5% metals basis2-聯(lián) 97%兔子Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒
化鋇,二水 CP,99%4-(Boc-氨基) 97%兔子4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒
碳鋇 CP,98%并噻吩-2- 98%兔子Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
碳鋇 99.95% metals basis4-叔丁基 97%兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒
碳鋇 99.8%,D50 0.5-1.5μm4-芐氧基 97%兔子Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒
碳鍶 電子級,0.3~0.5um,99.5%4-溴 97%兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒
氫氧化鍶 99.5%3,5-雙(三甲基) 97%兔子Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒
氧化鎘 AR,99%3-芐氧基-2,6-二 97%兔子Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒
氧化鎘 CP,98.5%2-丁氧基 97%兔子Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6)免疫試劑盒
氧化鎘 99.99% metals basis4-溴-2-(三甲基)甲 97%兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒
鎘 AR,99.0%4-溴-2-三酚 99%兔子Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)免疫試劑盒
花生源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管人Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒, BAX ELISA kit4-吡啶硫脲肌側索硬化癥相關蛋白1抗體
人P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒,SP-R ELISA4-吡啶硫脲β淀粉樣前體蛋白結合蛋白2抗體(X11β)
人醛縮(ALD)ELISA試劑盒,氫氧化釹(III)水合物乙酰輔A結合蛋白抗體
人血小板性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒,氫氧化釹(III)水合物磷化分裂周期蛋白16抗體
人波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒,2-環(huán)己基乙基溴白血病相關蛋白AHI1抗體
人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒,2-環(huán)己基乙基溴活化誘導胞嘧啶核脫氨抗體
小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒,4-(甲基)甲基三磷腺結合盒轉運蛋白9抗體
小鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒,DL-泛ADP核糖基化因子3抗體