細胞名稱  人胚胎氣管組織來源細胞；CCC-HBE-2品牌
形態(tài)特性

品牌 貼壁生長　

特征特性 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織，該細胞由中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心建立。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS  

傳代方法 1：

3傳代；3~4天1次。  

傳代情況 P4

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR 　

同工酶

染色體 　

使用權限 A類
人胚胎氣管組織來源細胞；CCC-HBE-2品牌貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
CT ELISA Kit 大鼠降鈣素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-ATF3/FITC 熒光素標記活化轉錄因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FADD Fas死亡結構域相關蛋白 規(guī)格 0.1ml

CDT ELISA Kit 大鼠糖缺失性轉鐵蛋白 96T

1-Mar 英文名稱： 膜相關環(huán)指蛋白1抗體 0.2ml

alpha 1 Fetoprotein 英文名稱： 甲胎蛋白抗體 0.1ml

Anti-ATF3/FITC 熒光素標記活化轉錄因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA Kit 大鼠胃腸癌標志物CA199Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-BNP/Biotin 生物素化腦鈉肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FRG2B FRG2B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

IL-16(Human Interleukin 16) ELISA KIT 人白介素16 96T

Neurogenin 3 英文名稱： 神經(jīng)元素3抗體 0.1ml

ABP1 英文名稱： 植物生長激素ABP1抗體 1ml

Anti-BNP/Biotin 生物素化腦鈉肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
豚鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒，英文名：SAA ELISA KiISA Kit for Human V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1大鼠表皮生長因子受體2(EGFR2)ELISA試劑盒，英文名：EGFR2 ELISA Kit大鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒，英文名：APLN ELISA KiISA Kit for Human Copper-transporting ATPase 1小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒，英文名：TNFsR-Ⅱ ELISA KiISA Kit for Human Advanced glycosylation end product-specific receptor小鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒，英文名：Cyclin-D1 ELISA KiISA Kit for Human Vasopressin-neurophysin 2-copeptin小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒，英文名：ODF ELISA KiISA Kit for cholyglycine小鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒，英文名：Collagenase II ELISA Kit

ELISA Kit for Human Apolipoprotein L1小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒，英文名：AChRab ELISA KiISA Kit for Human C-C chemokine receptor type 5小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒，英文名：Resistin ELISA KiISA Kit for Human Cytosolic non-specific dipeptidase小鼠β-防御素1(β-BD-1)ELISA試劑盒，英文名：β-BD-1 ELISA KiISA Kit for Human Cathepsin K小鼠生長調節(jié)致基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒，英文名：GROα/CXCL1/MGSA ELISA KiISA Kit for Human Beta-defensin 129小鼠載脂蛋白A2(APOA2)ELISA試劑盒，英文名：APOA2 ELISA KiISA Kit for Human Electron transfer flavoprotein-ubiquinone oxidoreductase, mitochondrial小鼠脫氧吡啶酚(DPD)ELISA試劑盒，英文名：DPD ELISA KiISA Kit for Human Fascin-2小鼠前動力蛋白2(PK2)ELISA試劑盒，英文名：PK2 ELISA Kit
終止液 12ml 進口分裝

VIP Receptor 1 英文名稱： 血管活性腸肽受體-1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin (Ser675) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基質金屬蛋白酶-26抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DARC 英文名稱： Duffy血型趨化因子受體抗體 0.2ml

Anti-AT2R 血管緊張素Ⅱ受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) ELISA Kit 小鼠幽門螺旋菌IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh EFR3A EFR3A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

(IL-2sR)ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受體 96T

Munc13 英文名稱： 神經(jīng)突觸前膜胞內蛋白13抗體 0.1ml

ATP6V0D2 英文名稱： ATP6V0D2蛋白抗體 0.2ml

Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。