詳細介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:D蛋白免費代測試劑盒說明
英文名稱:Gasdermin-D
檢測范圍:0.625ng/mL~20ng/mL
貨號:YS-E989225
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
IL1RAPL1 Others Human IL-1R8 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸伐昔洛韋水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口Valacyclovir hydrate
A-375 [A375], 惡性素瘤細胞株17-酮基維庫溴銨質(zhì)量規(guī)格:美國進口17-Keto Vecuronium Bromide
NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 細胞裂解液 (陽性對照) 3-去乙酰基維庫溴銨質(zhì)量規(guī)格:美國進口3-Desacetyl Vecuronium
大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL玉米素核苷同分質(zhì)量規(guī)格:美國進口Zeatin riboside mixed Isomers
B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞 B95-8 EBV conversion of leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸多沙普侖質(zhì)量規(guī)格:美國進口Doxapram
胚胎腸粘膜組織來源細胞;CCC-HIE-2液體生物防腐劑,英文名或英文縮寫:Proclin 300,級別:AR,99%,規(guī)格:25克
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細胞裂解液 (陽性對照) 碳醋鉍;減式碳醋鉍;碳醋氧鉍;碳醋鉍 BisMuth subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-磺酸,英文名或英文縮寫:Sulfamic acid,級別:BR,97%,規(guī)格:500克
CW-2細胞,結(jié)腸癌細胞 色素瘤細胞,A875細胞 急性早幼粒白血病細胞;HL-60PEPSTATIN胃蛋白酶抑制劑蛋白組學(xué)級25MG26305-03-3COLD
HCT-15(結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2(果膠酶Y-23)
EL4小鼠瘤細胞 EL4 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSFerricphosphatedihydrate嶙酸高鐵二水物5毫克高
白細胞介素-17超家族筋骨草甾酮C Ajugasterone C (HPLC,≥98%) 23044-80-6 10MG 標準品
腦血管周細胞 (HBVP) ( 5×105 ) 臍靜脈平滑肌細胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 癌細胞2-脫氧-2-拂-D-葡萄糖 Fludqoxyglucosq 970-43-0
CM-R041大鼠肝星形細胞*培養(yǎng)基100mL鹽酸黃,英文名或英文縮寫:Acriflavine xy7nochloride,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 細胞裂解液 (陽性對照) 硅酯 H-295NA
D蛋白免費代測試劑盒說明胰腺癌細胞;AsPC-1菊酯(標準品)Etofenprox質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5%
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 細胞裂解液 (陽性對照) 乙蒜素(標準品)Ethylicin質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99%
MDA-MB-453 癌細胞芥酸(標準品)Erucic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
NCI-H1650非小細胞肺癌細胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBSa-硫丹(標準品)α-Endosulfan質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 標簽)a-硫丹標準溶液(10μg/ml,u=5%)α-Endosulfan solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。