詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)!
產(chǎn)品名稱(chēng):單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型IgM抗體免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明
英文名稱(chēng):Herpes simplex virus Ⅰ+Ⅱ IgM Antibody
檢測(cè)范圍:0~
貨號(hào):YS-E989321
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
NCI-H358(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SH-SY5Y(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)L-正亮氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Norleucine
CL-0359HLF-a(肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-D-4-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH
CD28 Others Human CD28 / TP44 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3,5-二-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:BR,98%3,5-Diiodo-L-tyrosine
腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNAHRCEpiC NAL-脯氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRL-Proline methyl ester
MDA-MB-468細(xì)胞,癌細(xì)胞 猴的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,MSCS細(xì)胞 HT-29, 結(jié)腸癌細(xì)胞L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Serine methyl ester
小細(xì)胞肺癌;NCI-H2227依諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Enoxacin
CD3D & CD3E Others Mouse 小鼠 CD3D & CD3E Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) [Nle4,DPhe7] a-促激素酰胺; 美拉諾坦 I質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle4,DPhe7] a-MSH, amide; Melanotan I
COC1 卵巢癌細(xì)胞[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(1-34) 酰胺 (牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (1-34) amide (bovine)
AsPC-1轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 AsPC-1 human metastatic pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% Hyclone滅活血清[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(3-34) 酰胺(牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (3-34) amide (bovine)
TNFSF11 Protein Human 重組 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2-氨基咪唑鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%2-Aminoimidazole hemisulfate
CRL-2780細(xì)胞,結(jié)腸癌細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞,3T3D細(xì)胞 惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]乳酸脫氫酶(兔肌)5克
WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×26-溴乙酸 6-Bromohexanoic acid,97% 4224-70-8 5G 通用試劑
BMPR2 Others Human BMPR-II 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雙(三基硅基)安 litxium bis(trimqthylsilyl)cmidq 4039/3/1
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0919三扶乙醇,英文名或英文縮寫(xiě):TFEA,級(jí)別:CP,98%,規(guī)格:25克
臍帶靜脈平滑肌細(xì)胞 (HUVSMC)( 5×105 )NutrientBroth 100g/500g/北京250g BD 233000
單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型IgM抗體免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OM-prf芹糖甘草苷;甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷Liquiritin apioside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 芹糖異甘草苷;異甘草苷芹糖Isoliquiritin apioside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Chelerythrine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CNE1-lmp\l細(xì)胞,轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠色素瘤細(xì)胞,B16F1細(xì)胞 CM-H023甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLTAE684NVP-TAE684質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的ALK抑制劑
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2青蒿酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Artemisic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。