細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱:ACHN(人腎癌細(xì)胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號(hào):YS-02X9530
產(chǎn)品分類:細(xì)胞系
儲(chǔ)存條件2℃-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸
注意事項(xiàng)
1、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準(zhǔn)備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中
Culture培養(yǎng)基 250g 用于食品中細(xì)計(jì)數(shù)
瓊脂LT100 250g 用于食品中細(xì)計(jì)數(shù)
NGKG寒天基礎(chǔ)培地 250g 用于食品中蠟樣芽孢桿分離培養(yǎng)
GYP白亞瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于乳酸的分離培養(yǎng)
酪蛋白葡萄糖肉湯 250g 用于霉、酵母等的增培養(yǎng)
支原體培養(yǎng)基 250g 用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
EG培養(yǎng)基 250g 用于絕對(duì)厭氧計(jì)數(shù)
SBG增液 250g 用于沙門氏的選擇性增培養(yǎng)(特別是雞蛋制品中)
BCP寒天培地(含瓊脂) 250g 用于食品中乳酸的計(jì)數(shù)
大豆胨酵母浸粉瓊脂(PYE) 250g 用于真的選擇性分離培養(yǎng)
革蘭氏陰性增液 250g 用于革蘭氏陰性細(xì)增培養(yǎng)
卻普曼瓊脂 250g 用于檢測(cè)金
營(yíng)養(yǎng)鹽瓊脂(AATCC30) 250g 用于檢測(cè)紡織品的抗真活性
液體雙抗增液 250g 用于腦膜炎雙球的選擇增培養(yǎng)
ACHN(人腎癌細(xì)胞)山梨 規(guī)格: 50mg
毛地黃 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
125675-09-4苦蒿 規(guī)格: 20mg
104112-82-5黃柏 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
63902-38-5二 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
7491-74-9吡拉坦 規(guī)格: 100mg
79916-77-1連翹酯A;Forsythoside A 規(guī)格: 20mg
50773-41-6重樓皂I 規(guī)格: 20mg
迷迭香 規(guī)格: 20mg
8特丁凈;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.25g