細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱(chēng)貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱(chēng):NCI-N87(人胃癌細(xì)胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號(hào):YS-02X9678
產(chǎn)品分類(lèi):細(xì)胞系
儲(chǔ)存條件2℃-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸
注意事項(xiàng)
1、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準(zhǔn)備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中
妥因 英文名稱(chēng):Leflunomide impurity II 保存:-20℃ 規(guī)格:200mg 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體
多紫杉 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 20mg 酪蛋白激δ1抗體 25 HVD2 ELISA Kit 25羥基D2(25 HVD2)ELISA試劑盒
胺二氧基嘧(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfadimethoxine 植物桿 Lactobacillus plantarum美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus
訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 幾質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 SNRPA ELISA Kit U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA試劑盒
γ-倒捻子素;γ- Mangostin 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 20mg 細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體 IL-20 ELISA Kit 白介素20(IL-20)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):Losartan potassium 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白1抗體
鈷試劑(1-亞基-2-) 質(zhì)量規(guī)格:AR 1-Nitroso-2-Naphthol 爪哇正青霉 Eupenicillium javanicum炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius
司坦唑 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 100mg 3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框20抗體 CG ELISA Kit 甘膽(CG)ELISA試劑盒
3-異構(gòu)體 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Leflunomide 3-Isomer 神經(jīng)母細(xì)胞瘤英文名稱(chēng):LAN-6
蟾靈 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 肌鈣集蛋白/收鈣素抗體 PTEN/MMAC1 ELISA Kit 第10號(hào)染色體缺失并與張力蛋白同源的(PTEN/MMAC1)ELISA試劑盒
醋 英文名稱(chēng):Prednisone acetate 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg 堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA抗體
白茅根 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 1g 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框124抗體 IFN-γR ELISA Kit γ干擾素受體(IFN-γR)ELISA試劑盒
MCLA (>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) MCLA 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基小鼠牙細(xì)胞*培養(yǎng)基
NCI-N87(人胃癌細(xì)胞)22139-77-1赤松;Pisylvin 規(guī)格: 20mg
5041-81-6異甘草; Isoliquiritin 規(guī)格: 20mg
509-18-2硬飛燕草 規(guī)格: 20mg
一磷腺鈉 規(guī)格: 20mg/支
568-73-0丹參Ⅰ;Tanshine I 規(guī)格: 20mg
82854-37-3松果菊 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
麥芽三糖 規(guī)格: 100mg
27975-19-5異甜菊 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
18642-23-4補(bǔ)骨脂定 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
2415-24-9梓 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支