測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
我司供應(yīng)的生化檢測試劑盒,僅供科研使用。
產(chǎn)品名稱 | 測定方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒 | 微量法、可見分光光度法 | 100管/96樣 、50管/48樣 | BJ-01S85323 |
商品介紹:
測定意義
SDH(EC 1.3.5.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。SDH是線粒體的一種標(biāo)志酶,位于線粒體內(nèi)膜上的一種膜結(jié)合酶,是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外,為多種原核細(xì)胞產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子。
測定原理
SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸,脫下的氫通過吩嗪二甲酯硫酸(PMS)傳遞還原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm處具有特征吸收峰,通過600nm吸光度的變化,測定2.6-DPIP的還原速度,代表SDH酶活性。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷化原基因c-Jun抗體 0.1ml
CD30/TNFRSF8 CD30抗體 規(guī)格: 0.1ml
Slc4a7/Nbcn1 碳鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)4-A7抗體 規(guī)格: 0.2ml
PLRP1/PNLIPRP1 胰脂肪相關(guān)1抗體 規(guī)格: 0.1ml
intestinal FABP/IFABP 腸型脂肪結(jié)合抗體 規(guī)格: 0.1ml
BDH1 3-羥丁脫抗體 規(guī)格: 0.2ml
GLP2R 樣肽2受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
ARA24 雄激受體相關(guān)24抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml
IL-6 白介6抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/APC APC標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.3ml
琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒611-40-5射干 規(guī)格: 20mg
拉呋丁 規(guī)格: 100mg
59-67-6煙(B3);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證 規(guī)格: 0.25g
26575-95-123-乙酰澤瀉B 規(guī)格: 20mg
568-72-9丹參IIA 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支
68-19-9B12 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg
磷轉(zhuǎn)乙?;?/span> 規(guī)格: 120U /支
17659-49-3消旋山莨菪;Racanisodamin 規(guī)格: 20mg
970-74-1表沒食子兒茶 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
規(guī)格: 100mg