詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):同艾特韋病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Egtved Virus(VHSV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
百日咳波氏桿菌探針?lè)晒舛?span>PCR試劑盒
波氏桿菌(博代氏桿菌)通用探針?lè)晒舛?span>PCR試劑盒
阿氏疏(阿氏包柔)探針?lè)晒舛?span>PCR試劑盒
鵝疏(鵝包柔)探針?lè)晒舛?span>PCR試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
FUT8: 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶8抗體 0.2ml
抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體 Anti-Glasses Snake poison Protein 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SirT1 (Ser27) 0酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-FITC 兔抗熒光素 (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)ELISA試劑盒 ,英文名: VCAM1 ELISA Kit
兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 96T/48T
犬α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒 Canine α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit
英文名稱(chēng)HumanNeuroophin-4,-4ELISAkit人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-4(-4)規(guī)格:96T/48T
單酸甘油脂脂解酶(monoacylglycerollipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
同艾特韋病毒PCR檢測(cè)試劑盒HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-AATK AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr249) 0酸化原癌基因c-Jun抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗BSA 0.5ml 國(guó)產(chǎn)
WDR26 英文名稱(chēng): 心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml
DP-II 英文名稱(chēng): 橋粒斑蛋白2抗體 0.2ml
Anti-AATK AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。