詳細(xì)介紹
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞說(shuō)明:
骨骼肌細(xì)胞是人體內(nèi)最大的細(xì)胞之一。它們是成肌細(xì)胞融合形成的多核細(xì)胞。骨骼肌再生是有許多因素參與的復(fù)雜過(guò)程。當(dāng)骨骼肌受損時(shí),靜止的、被稱為衛(wèi)星細(xì)胞的成肌細(xì)胞被激活增殖、遷移、最終分化。多種的細(xì)胞信號(hào)途徑,包括磷脂酰肌醇(-3)激酶、鈣神經(jīng)素、JAK2/STAT3和有絲分裂原活化蛋白激酶,參與骨骼肌的生長(zhǎng)。在體外培養(yǎng)的人類骨骼肌細(xì)胞中進(jìn)行的骨骼肌分化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)是葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4介導(dǎo)的,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖也與此過(guò)程有關(guān)。單核細(xì)胞融合形成多核肌管是骨骼肌發(fā)育的中心事件。該過(guò)程的發(fā)生和進(jìn)展中,成肌細(xì)胞控制著一系列復(fù)雜的交互活動(dòng)。骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化中該過(guò)程的重要模型。
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(HSkMC)提取于人肩帶骨骨骼肌組織,原代凍存。每管含有細(xì)胞數(shù)>5×105cells/ml,此細(xì)胞通過(guò)對(duì)myosin, actin和actinin免疫熒光染色驗(yàn)證,經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。細(xì)胞可以達(dá)到15倍增。
推薦培養(yǎng)基: (SkMCM, Cat. No. 3501)
產(chǎn)品使用說(shuō)明:僅供科研研究使用。
貨號(hào) | 3100 |
產(chǎn)地 | 美國(guó) |
縮寫 | HPAEC |
規(guī)格 | 5x10^5cells
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用途 | 科研 |
運(yùn)輸 | 干冰 |
保存 | 液氮 |
附:
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗)。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細(xì)胞密度較小,無(wú)菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
②若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來(lái)FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,請(qǐng)當(dāng)天反饋并提供圖片,且保存前三天照片以便分析。7天內(nèi)反饋,細(xì)胞本身問(wèn)題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費(fèi)售后