詳細介紹
MR-32人神經(jīng)母細胞瘤細胞系背景描述:
6T-CEM細胞是一個CCRF-CEM [CCRF CEM]的6-硫niao嘌呤抗性變種;HPRT、HGPRT缺陷并能分泌高滴度的免疫抑制因子。6T-CEM細胞通常用作T細胞雜交瘤的融合對象。
生長培養(yǎng)基RPMI-1640(貨號:PM150110)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120);
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%;
溫度:37℃;
MR-32人神經(jīng)母細胞瘤細胞系產品說明:
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶;
特點:細胞代數(shù)為4代以內包裝:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;
說明書細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC;
貨期:1-2周;
運輸方式:快遞運輸;
售后:收到細胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質量問題報告并及時chuan真或致銷售人員,我們將盡快為您解決!上海雅吉生物與您攜手共進!以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時或郵件。需要特別指出的是:如細胞出現(xiàn)問題,請于48h內及時反饋,本公司將竭誠為您服務!
貼壁細胞:客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰mei-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
懸浮細胞:
1、接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X 各一張)。
3、嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4、將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5、1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
一毫升小管操作方法 小管內也是此細胞。
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的);
2、嚴格無菌操作,用吸管吸出管中細胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3、1000rpm,5min離心,重懸細胞。
4、換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO7 培養(yǎng);