詳細介紹
1.產(chǎn)品名稱:大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞
2.組織來源:股骨、脛骨組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞分離自股骨、脛骨;骨內(nèi)膜是一層致密結締組織膜,覆蓋在骨的表面(關節(jié)面除外),新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色,含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細胞。此外,附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng),通過骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層,外層主要是粗大的膠原纖維束,部分纖維穿入骨質(zhì),使骨內(nèi)膜固定于骨面;內(nèi)層疏松,含成骨細胞和破骨細胞(分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結締組織膜,叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力,以形成新骨質(zhì)和破壞、改造已生成的骨質(zhì),所以對骨的發(fā)生、生長、修復等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
本公司生產(chǎn)的采用沖洗骨髓、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經(jīng)CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM-F12、FBS、間充質(zhì)干細胞生長添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:CM-R161)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
T25瓶細胞處理方法
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3.預熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4.顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
②若細胞密度較大,達到80%以上,將細胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快聯(lián)系并提供圖片,以便售后處理。7天內(nèi)反饋,細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費售后
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