詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
2.組織來(lái)源:腦動(dòng)脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織;腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán);靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行,所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈;各級(jí)靜脈都沒有瓣膜,它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能:①維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡;②合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì);③維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
M199、FBS、內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-M100)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
三、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代;建議您收到
細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培
養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和
技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)
和我們,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考