詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱:小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
2.組織來源:腸道組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至肛門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)肛門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的*道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
本公司生產(chǎn)的采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
M199、FBS、上皮細(xì)胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:CM-M030)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
三、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞可傳3-5代;建議您收到
細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和
技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時
和我們,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考