注意事項(xiàng)

1. 首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并
及時(shí)與  （所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞
會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 2-4 小
時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用
基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)
依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過 80%，可正常傳代；若未超過 80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培
養(yǎng)基，預(yù)留 5ml 左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá) 80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微
擰松。
6. 懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至 50ml 無菌離心管內(nèi)，1200rpm 離心 5min，
離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入 5ml 培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若
細(xì)胞密度超過 80%，可將細(xì)胞懸液分至 2 個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至 5ml；若
細(xì)胞密度未超過 80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá) 80%左右時(shí)再進(jìn)行
傳代操作。