詳細介紹
細胞名稱:人乳腺癌細胞Bcap-37
生長特性:貼壁 懸浮 半懸浮半貼壁(詳情可咨詢我們)
生長條件:詳情索取該產(chǎn)品說明書
培養(yǎng)條件:90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)溫度:37℃
空氣條件:5% CO2,95% AIR
傳代方法:1:2傳代,2~3天換液
凍存條件:0%FBS+10%DMSO
人乳腺癌細胞BcaP-37描述:
源自一位48歲女性乳癌患者。
組織來源:乳癌
細胞形態(tài):上皮細胞樣
人乳腺癌細胞Bcap-37,使用方法
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,zui后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細胞*貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
,原代細胞與細胞系有什么區(qū)別?細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞zui大的生長空間,以保持細胞群中基因型和表型的*性。細胞系是不斷生長,分化的細胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上,連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
1、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍,通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。
2、接收到的凍存細胞該如何處理?收到包裝箱后,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
3、有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)?推薦有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室,我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。
,部分相關(guān)產(chǎn)品如下:
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