詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱:小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT-20
生長特性:貼壁 懸浮 半懸浮半貼壁(詳情可咨詢我們)
生長條件:詳情索取該產(chǎn)品說明書
培養(yǎng)條件:90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)溫度:37℃
空氣條件:5% CO2,95% AIR
傳代方法:1:2傳代,2~3天換液
凍存條件:0%FBS+10%DMSO
AtT-20小鼠垂體瘤細(xì)胞描述:
AtT20生長時(shí)不貼壁,而結(jié)成活細(xì)胞團(tuán)。能抗脊髓灰質(zhì)炎病毒。檢測發(fā)現(xiàn)肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
動(dòng)物種別 :小鼠
組織來源 :垂體;瘤
形態(tài) :小的圓形細(xì)胞
小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT-20,使用方法
1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,zui后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞*貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
,原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?細(xì)胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞zui大的生長空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性。細(xì)胞系是不斷生長,分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實(shí)際上,連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
1、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長。
2、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃,這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
3、有多少經(jīng)驗(yàn)才能開始正常人類細(xì)胞培養(yǎng)?推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗(yàn)的話對(duì)其它細(xì)胞類型也是很有利的。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,我們會(huì)為你提供幫助。請(qǐng)的細(xì)胞培養(yǎng)專家。
,部分相關(guān)產(chǎn)品如下:
CD68抗體
膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體
轉(zhuǎn)化生長因子β1/TGF β1/TGF-β1抗體
波形蛋白抗體
腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體
CD34抗體
腫瘤壞死因子-α/TNFα/TNF-α抗體
I型膠原蛋白/膠原蛋白1/1型膠原蛋白/I型膠原
Toll樣受體4抗體
血管內(nèi)皮生長因子抗體
Ki67蛋白抗體
蛋白激酶B抗體
基質(zhì)金屬蛋白酶2抗體
轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體
CD3/CD3-ε 抗體
堿性成纖維細(xì)胞生長因子/FGF2抗體
絲裂原活化蛋白激酶p38α抗體
熱休克蛋白-70抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體
白介素1β/IL-1β抗體
凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體
細(xì)胞色素C抗體
細(xì)胞間粘附分子-1抗體
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