CuZn/Mn-SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)(Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8)是一種基于WST-8的顯色反應，通過比色來檢測細胞、組織或其它樣品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或總SOD活性的試劑盒。
      超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase,SOD)能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用，生成過氧化氫(H2O2)和氧氣(O2)，是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。
      目前有多種SOD活性測定法，其中NBT(氮藍四唑)法由于使用方便而被廣泛使用。但NBT法產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差，易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率達不到100%等，從而使檢測的靈敏度和精確度受到影響；細胞色素C法也是一種常用來檢測SOD活性的方法，但細胞色素C其氧化活性高，易受樣品中的還原劑干擾，另外該方法需要連續(xù)測定吸光度值，對于SOD的檢測靈敏度比較低，并且不太適合大批量樣本的檢測。
      目前測定SOD比較先進的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加穩(wěn)定、靈敏度更高。本試劑盒采用了目前測定SOD方法中穩(wěn)定性更好、靈敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理參考下圖，WST-8可以和黃嘌呤氧化酶催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子反應產(chǎn)生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，該反應步驟可以被SOD所抑制。通過對WST-8產(chǎn)物的比色分析即可計算SOD的酶活力。
                
      基于黃嘌呤氧化酶藕聯(lián)反應體系和WST-8的SOD酶活力檢測原理圖。XO：xanthine oxidase。
      WST-8的反應產(chǎn)物是穩(wěn)定的水溶性產(chǎn)物，可以通過單個時間點的吸光度檢測來測定SOD活力，適合高通量篩選研究。同時WST-8法測定SOD酶活力時，zui大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常見的干擾因素的干擾，使檢測效果比其它的一些常見方法顯著改善。 
      CuZn/Mn-SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)的檢測不受樣品中過氧化氫的干擾。很多細胞和組織樣品中含有內(nèi)源性的過氧化氫，會干擾SOD的檢測。本試劑盒通過添加適量過氧化氫酶等特殊方法，能有效去除常規(guī)樣品中過氧化氫的干擾。例如，對于SOD標準品的檢測，標準品中添加高達0.1mM的過氧化氫時，對于檢測結(jié)果仍無顯著影響。
      哺乳動物編碼3種SOD。在大部分組織中，含量zui高的是定位在細胞漿中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表達在線粒體中，并且Mn-SOD是可以被誘導表達的。Mn-SOD在某些情況下也可以定位在細胞漿中。有些組織或體液中會含有第三種SOD，extracellular SOD，簡稱EC-SOD。EC-SOD也是一種Cu/Zn-SOD，和編碼細胞漿Cu/Zn-SOD的基因相似性很高，但有所不同。綜上所述，細胞或組織內(nèi)共有兩類SOD，即銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。這兩種SOD酶活性的總量就是總SOD的酶活性。當用Cu/Zn-SOD的抑制劑抑制其酶活性時測定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此時同時測定總的SOD酶活性，就可以計算出Cu/Zn-SOD的酶活性。
      KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性，也被大量用于測定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有，并且對Cu/Zn-SOD的抑制百分比達不到很接近100%。
      本試劑盒采用了一種無毒的兩步雙重抑制Cu/Zn-SOD的方法，在避免使用有品的情況下同時確保了對于Cu/Zn-SOD的抑制百分比達到高度接近100%，即對于Cu/Zn-SOD的抑制*優(yōu)于KCN或NaCN。使對于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的測定更加安全和準確。
      CuZn/Mn-SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)可以檢測細胞或組織勻漿液上清、全血、紅細胞抽提物、血清等生物樣品中的SOD活性。一個試劑盒共可以進行100次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號    產(chǎn)品名稱    包裝
S0103-1    SOD檢測緩沖液    70ml
S0103-2    WST-8    800μl
S0103-3    酶溶液    100μl
S0103-4    反應啟動液(40X)    60μl
S0103-5    Cu/Zn-SOD抑制劑A    500μl
S0103-6    Cu/Zn-SOD抑制劑B    500μl
—    說明書    1份
保存條件：
      -20℃保存，半年有效。S0103-2 WST-8溶液需避光保存。
注意事項：
      待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
      細胞或組織等樣品制備時不能采用含有Triton X-100等去垢劑的溶液，否則會干擾本試劑盒的檢測。
      抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色，如果設置了使用說明中的空白對照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。       Cu/Zn-SOD抑制劑A對人體有刺激性，操作時請小心，并注意適當防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
     CuZn/Mn-SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。