螢火蟲螢光素酶基因檢測試劑盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit)，是一種以螢光素
(luciferin)為底物來檢測螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)活性的試劑盒。
      螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61kD的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物螢光(bioluminescence)。生物螢光可以通過化學發(fā)光儀(luminometer)或液閃測定儀進行測定。本試劑盒的檢測原理參考圖1。

圖1. 螢火蟲螢光素酶的檢測原理圖。
      通過螢光素和螢光素酶這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉錄調(diào)控元件或5’啟動子區(qū)克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR區(qū)克隆在luciferase的下游等，構建成報告基因(reporter gene)質(zhì)粒。然后轉染細胞，用適當藥物等處理細胞后裂解細胞，測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調(diào)控作用。
      螢火蟲螢光素酶催化luciferin發(fā)光的zui強發(fā)光波長為560nm(centered around 560nm)。
      螢火蟲螢光素酶基因檢測試劑盒可以測定100個樣品。
包裝清單：
產(chǎn)品編號    產(chǎn)品名稱    包裝
RG005-1    報告基因細胞裂解液    60ml
RG005-2    螢火蟲螢光素酶檢測試劑    10ml
—    說明書    1份
保存條件：
      報告基因細胞裂解液4℃保存3個月有效，-20℃保存一年有效；螢光素酶檢測試劑-20℃避光保存6個月有效，-80℃避光保存一年有效。
注意事項：
      為取得*測定效果，在用單管的化學發(fā)光儀測定時，樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應盡量控制在相同時間內(nèi)，例如30秒內(nèi)；使用具有化學發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標儀時，宜先把樣品全部加好，然后統(tǒng)一加入螢火蟲螢光素酶檢測試劑。
      由于溫度對酶反應有影響，所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
      為保證螢光素酶檢測試劑的穩(wěn)定性，可以采取適當分裝后避光保存的方法，以避免反復凍融和長時間暴露于室溫。經(jīng)測試，反復凍融三次，對測定結果無明顯影響。
      樣品和測定試劑混合后，必須等待1-2秒，再進行測定。測定時間通常為10秒，根據(jù)情況也可以測定更長或更短時間，但是同一批樣品宜使用相同的測定時間。
      為避免由于質(zhì)粒轉細胞時效率的差異而帶來的誤差，可以同時轉入海腎螢光素酶(Renilla luciferase)的報告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參，采用碧云天的雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG027/RG028)進行檢測；也可以同時轉入β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)報告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參，然后采用碧云天生產(chǎn)的β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(RG0036)進行檢測。采用本試劑盒中的報告基因細胞裂解液裂解獲得的樣品可以直接用于β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(RG0036)的檢測。
      僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。