詳細(xì)介紹
CellTiter-Lumi™發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit),簡(jiǎn)稱CTL發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒或CTL,是一種通過(guò)化學(xué)發(fā)光法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ATP含量從而用于超高靈敏度、超寬線性范圍定量檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目的試劑盒。
本試劑盒的性能基本達(dá)到甚至在有些方面優(yōu)于國(guó)外同類產(chǎn)品。本產(chǎn)品的用途與CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell
Viability Assay(簡(jiǎn)稱CTL Plus)及Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(簡(jiǎn)稱CellTiter-Glo®或CTG)基本相同,檢測(cè)靈敏度和發(fā)光檢測(cè)數(shù)據(jù)略優(yōu)于CTL Plus,顯著優(yōu)于CTG,線性范圍和CTL Plus和CTG相近,但檢測(cè)上限和發(fā)光檢測(cè)數(shù)據(jù)隨時(shí)間的穩(wěn)定性稍稍低于CTL Plus和CTG。本產(chǎn)品與CTL Plus和國(guó)外同類產(chǎn)品(Competitor P)的檢測(cè)效果比較參見(jiàn)圖1。
CellTiter-Lumi™發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒線性范圍寬。96孔板中,在12個(gè)至3萬(wàn)個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。不同細(xì)胞的檢測(cè)數(shù)量上限會(huì)有顯著不同。如果檢測(cè)的細(xì)胞數(shù)量超過(guò)3萬(wàn),推薦使用檢測(cè)上限更高的CellTiter-Lumi™ Plus發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(C0068)。
本產(chǎn)品發(fā)光強(qiáng)度高。對(duì)于相同的細(xì)胞樣品,通常在3萬(wàn)個(gè)細(xì)胞數(shù)量范圍內(nèi),本產(chǎn)品的發(fā)光效果比CTL Plus強(qiáng)約20-100%,比國(guó)外同類產(chǎn)品強(qiáng)1-3倍,實(shí)測(cè)效果會(huì)因細(xì)胞種類的不同而有所不同。例如,對(duì)于NIH3T3和HeLa細(xì)胞的檢測(cè),CTL的發(fā)光強(qiáng)度比CTL Plus高約40-100%,比國(guó)外同類產(chǎn)品強(qiáng)約2-3倍;而對(duì)于Jurkat細(xì)胞的檢測(cè),CTL的發(fā)光強(qiáng)度則比CTL Plus強(qiáng)約20-70%,比國(guó)外同類產(chǎn)品強(qiáng)約1.5-3倍(圖1D)。
本產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高。使用本產(chǎn)品檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量?jī)H為25個(gè)/孔時(shí),發(fā)光強(qiáng)度可達(dá)空白孔的2倍左右。本產(chǎn)品與CTL Plus和國(guó)外同類產(chǎn)品(Competitor P)的檢測(cè)效果比較參見(jiàn)圖1。
圖1. 本產(chǎn)品CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit (CTL)和同類產(chǎn)品CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay (CTL Plus)及國(guó)外同類產(chǎn)品(Competitor P)對(duì)不同細(xì)胞的檢測(cè)效果。圖A-C為CTL、CTL Plus和Competitor P對(duì)不同數(shù)量HeLa細(xì)胞在白色96孔板中的檢測(cè)效果,圖D為CTL、CTL Plus和Competitor P對(duì)2.5萬(wàn)個(gè)/孔NIH3T3、HeLa和Jurkat細(xì)胞在白色96孔板中的檢測(cè)效果。實(shí)際讀數(shù)會(huì)因細(xì)胞種類、檢測(cè)儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
CellTiter-Lumi™發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒操作簡(jiǎn)單,讀數(shù)穩(wěn)定,檢測(cè)速度快,完成檢測(cè)僅需約10分鐘。本產(chǎn)品比常見(jiàn)的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細(xì)胞活力測(cè)定方法更加簡(jiǎn)單快捷。只需把試劑盒提供的單一即用型試劑CellTiter-Lumi™發(fā)光法檢測(cè)試劑與培養(yǎng)細(xì)胞等體積混合,反應(yīng)10分鐘后即可進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。無(wú)需洗滌細(xì)胞,也無(wú)需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學(xué)發(fā)光比較穩(wěn)定,在反應(yīng)開(kāi)始后的10分鐘內(nèi)下降不超過(guò)10%,30分鐘內(nèi)的下降不超過(guò)30%。
本產(chǎn)品穩(wěn)定性好。本試劑盒中的CellTiter-Lumi™發(fā)光法檢測(cè)試劑穩(wěn)定性好,反復(fù)凍融5次對(duì)檢測(cè)效果基本無(wú)影響,反復(fù)凍融10次檢測(cè)效果下降不超過(guò)10%。本產(chǎn)品4℃保存3天對(duì)檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,4℃保存7天檢測(cè)效果下降不超過(guò)10%。室溫保存1天,仍可保留80%以上的檢測(cè)效果。37℃保存1天,可保持60%以上的檢測(cè)效果。
CellTiter-Lumi™發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒使用靈活便捷。本產(chǎn)品不僅適合少量樣品的檢測(cè),也非常適合大量樣品的高通量篩選(high-throughput screening)檢測(cè)。
ATP,作為zui重要的能量分子,在細(xì)胞的各種生理、病理過(guò)程中起著重要作用。ATP是細(xì)胞新陳代謝的一個(gè)重要指標(biāo),也是具有代謝活性細(xì)胞的重要標(biāo)志性分子,并和活細(xì)胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此,ATP含量能很好地反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目,即本試劑盒可以通過(guò)測(cè)定ATP含量來(lái)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)或檢測(cè)細(xì)胞活力。