詳細(xì)介紹
上海雅吉生物生產(chǎn)的Bradford蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)zui常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一
Bradford法研制而成,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速、穩(wěn)定和高靈敏度,并且檢測數(shù)據(jù)有很好的線性關(guān)系。
Bradford法的檢測原理是考馬斯亮藍(lán)(Coommassie Brilliant Blue)G-250與蛋白質(zhì)的堿性和芳香族氨基酸特別是精氨酸
(Arginine)在酸性介質(zhì)中結(jié)合后,溶液轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色,溶液zui大吸收峰從465nm遷移到595nm,顏色的變化與蛋白質(zhì)濃度成正比。因此,可通過檢測595nm處的吸光度對溶液中蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行測定。
本試劑盒檢測速度極快,10-20個(gè)樣品只需不足10分鐘即可完成,和BCA法相比大大縮短了檢測時(shí)間。
本試劑盒檢測靈敏度高,zui小蛋白檢測量達(dá)到0.5μg。
本試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系好。常規(guī)的Bradford法的標(biāo)準(zhǔn)曲線是非線性的。上海雅吉的本試劑盒進(jìn)行了精心優(yōu)化,確保5μl體積的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品在0.1-1.5mg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系(參考圖1)。
圖1. 本試劑盒蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)測效果圖。圖中數(shù)據(jù)僅供參考,實(shí)際的檢測效果可能會略有不同。
與測定蛋白濃度的其它方法如BCA法和Lowry相比,Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,尤其是還原試劑的影響。樣品中β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)的濃度可高達(dá)1M,二硫蘇糖醇(DTT)的濃度可高達(dá)5mM。但本試劑盒受略高濃度的去垢劑影響,需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20、60、80低于0.015%。含去垢劑的樣品推薦使用上海雅吉生產(chǎn)的Bradford蛋白濃度測定試劑盒(去垢劑兼容型)(P0006C)或上海雅吉生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測定試劑盒(P0009, P0010, P0010S, P0011, P0012, P0012S)。
對樣品中各種物質(zhì)的詳細(xì)的兼容性
每個(gè)試劑盒可以檢測1000個(gè)樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
P0006-1 G250染色液 125ml×2
P0006-2 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml BSA) 1.5ml
— 說明書 1份
保存條件:
4℃保存,一年有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)可以-20℃長期保存。
注意事項(xiàng):
蛋白標(biāo)準(zhǔn)請?jiān)谌咳芙夂笙然靹?,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白?biāo)準(zhǔn)。
將G250染色液回復(fù)到室溫再使用,有利于提高檢測的靈敏度。
需可檢測560-610nm之間波長的酶標(biāo)儀一臺,*檢測波長為595nm。并需96孔板。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。