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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>CUT&RUN技術(shù)在功能性全基因組圖譜方面的重要應(yīng)用
我們知道,基因表達(dá)可以通過許多不同的機(jī)制進(jìn)行調(diào)節(jié),包括轉(zhuǎn)錄因子、組蛋白和其他DNA結(jié)合蛋白。繪制出DNA和蛋白質(zhì)之間的相互作用圖譜,對(duì)于理解基因激活或抑制以及其他細(xì)胞過程至關(guān)重要。
傳統(tǒng)上,可以通過進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀和測(cè)序(ChIP-seq)來分析這些相互作用。但是這種方法需要大量的起始材料才能產(chǎn)生足夠強(qiáng)的信號(hào)以消除背景噪聲,并且經(jīng)常返回假陽性信號(hào)。同時(shí),ChIP-seq還需要優(yōu)化的超聲處理來破碎染色質(zhì),這可能非常耗時(shí)并可能導(dǎo)致樣品損失。
在zui近的一項(xiàng)研究中,佛羅里達(dá)大西洋大學(xué)和國家糖尿病、消化和腎臟疾病研究所的科學(xué)家們利用CUT&RUN技術(shù)建立了一個(gè)功能性全基因組圖譜,該圖譜是一種稱為缺氧誘導(dǎo)因子的蛋白質(zhì)復(fù)合物的特異性結(jié)合位點(diǎn)—HIF1α,位于人眼的晶狀體中。該團(tuán)隊(duì)表示選擇CUT&RUN而不是ChIP-seq分析,是因?yàn)榍罢卟恍枰?span style="font-family: Calibri;">DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)。此外,與ChIP-seq相比,前者成功實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞計(jì)數(shù)J低。
在該實(shí)驗(yàn)中,CUT&RUN技術(shù)得以成功的應(yīng)用,有助于接下來的大量研究,重點(diǎn)是了解某些蛋白質(zhì)可能對(duì)基因表達(dá)的作用。
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