產(chǎn)品簡介
寡核苷酸色譜柱采用經(jīng)過C18官能化處理的第二代雜化硅膠BEH技術顆粒。基于成熟的離子對反相色譜方法進行去三苯甲基合成寡核苷酸樣品的分離。采用1.7μm UPLC顆粒或2.5μm HPLC/UHPLC顆粒的不同規(guī)格色譜柱為分析帶來了極大的靈活性,可滿足各種實驗室規(guī)模的分離或分析需求,還能實現(xiàn)出色的樣品分離度和極長的色譜柱壽命。
詳細介紹
寡核苷酸的分析與分離
合成寡核苷酸和DNA片段被應用于迅速發(fā)展的應用領域,包括作為主體或雜交探針用于治療性制劑。沃特世寡核苷酸分離技術(OST:Oligonucleotide Separation Technology)基于BEH雜化顆粒的反相色譜柱,以及Gen-Pak離子交換柱,應對各種高分辨分析與實驗室規(guī)模分離挑戰(zhàn)所需,包括涉及各種DNA和RNA品種。
寡核苷酸分析柱 — 異乎尋常的高分辨率
沃特世寡核苷酸色譜柱裝有鍵合了C18的第二代雜化技術BEH顆粒。對去三苯甲基(detritylated,或稱脫保護)的合成寡核苷酸樣品的分離,基于成熟的離子對反相色譜法。
沃特世提供1.7 μm UPLC顆?;?.5 μm HPLC顆粒,裝填以各種不同色譜柱規(guī)格,從而靈活滿足各種實驗室規(guī)模分離或分析的不同需求,并能實現(xiàn)異乎尋常的樣品分辨率和的色譜柱使用壽命。此外,沃特世的制造和質(zhì)控測試程序,有助于確保批次之間與柱之間的性能的*性,而無論應用的難度有多高。
分離效率相當于或優(yōu)于PAGE、CGE、或離子交換HPLC方法
可從去三苯甲基(脫保護)的全長產(chǎn)物中分辨出失敗序列
可放大的柱規(guī)格,滿足實驗室規(guī)模的分離需求
超長的色譜柱使用壽命,降低單次分析或分離成本
經(jīng)MassPREP OST標準品質(zhì)控測試,幫助確保性能穩(wěn)定
杰出的色譜柱壽命
在這些苛刻的分離條件下,填充以BEH技術顆粒的沃特世寡核苷酸色譜柱顯示出引人注目的柱壽命,同時還具有并保持的分離性能。而在相同的苛刻分離條件下,傳統(tǒng)硅膠基質(zhì)色譜柱的使用壽命顯著縮短。
干擾RNA寡核苷酸的UPLC/MS分析
RNA干擾(RNAi)機制的發(fā)現(xiàn)現(xiàn)在被廣泛用于靜默目標基因表達,這推動了對小分子干擾RNA(siRNA)分析的需求。為滿足對20-25個核苷酸的小分子干擾RNA(siRNA)進行耐用的、快速的、靈敏的分析的需求,沃特世開發(fā)了一個UPLC/MS方法,運用了UPLC OST色譜柱和Synapt HDMS
質(zhì)譜儀。
采集準確質(zhì)量可對5’-截斷寡聚體(寡核苷酸合成過程所產(chǎn)生的失敗序列)以及其它一些雜質(zhì)峰進行分配。質(zhì)譜圖中的質(zhì)量的每個峰均使用MaxEnt 1軟件進行去卷積化。圖2給出了推測性的5’-端失敗產(chǎn)物。對寡核苷酸母體的幾乎完整序列均進行了解釋。質(zhì)譜分析還顯示除了目標21-mer RNAi序列以外,還存在一個額外的尿苷單核苷酸。