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目的：

       建立高壓蒸汽滅菌生物指標(biāo)菌—嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片的使用規(guī)程，保證正確使用，對高壓蒸汽滅菌效果進行驗證。生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風(fēng)櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進氣口使用HEPA過濾器。

     2.  依據(jù)：     

     高壓蒸汽滅菌生物指標(biāo)菌菌片使用說明書。壓力蒸汽滅菌器具有造型新穎美觀、結(jié)構(gòu)合理、功能齊全、加熱迅速、滅菌*等優(yōu)點。適用于醫(yī)療、科研、食品、等單位對手術(shù)器械、敷料、玻璃器皿、橡膠制品、食品、藥液、培養(yǎng)基等物品進行滅菌。

     3.  范圍：

     本標(biāo)準(zhǔn)適用于用高壓蒸汽滅菌生物指標(biāo)菌—嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片對高壓蒸汽滅菌效果進行的監(jiān)測。

      4.  職責(zé)：

      壓力蒸汽滅菌器操作人員、QA檢查員、QC微生物檢驗員對本標(biāo)準(zhǔn)的實施負責(zé)。

      5.  程序：

      5.1.  采用生物滅菌指標(biāo)菌來檢查高壓蒸汽滅菌效果是科學(xué)、可靠的檢測方法。嗜熱脂肪桿菌芽胞

　　是*的生物指標(biāo)菌。該菌具有以下特點：   

      5.1.1.  適生長繁殖溫度為56℃,培養(yǎng)24小時即可形成菌落。

      5.1.2.  該菌為需氧芽胞桿菌，其細菌繁殖體對培養(yǎng)基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨瓊脂上呈米黃色。

      5.1.3.  該菌無毒，熱抗性穩(wěn)定，在4℃冰箱下保存6個月抗力無明顯下降，在常溫下（20℃左右）可保存1個月。

熱死亡時間為121℃，3.9分鐘陽性，19分鐘陰性，D10值1.3~1.9分鐘,符合美國藥典規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。

      5.2.  結(jié)構(gòu)：本生物指示劑由菌片、恢復(fù)培養(yǎng)基和外管組成，菌片由嗜熱脂肪桿菌芽胞制備而成，染菌量為5.0×105~5.0×106cfu/片。

      5.3.  使用方法：

5.3.1. 本生物指示劑適用于各型壓力蒸汽滅菌器滅菌效果的監(jiān)測。

5.3.2. 使用時，將生物指示劑放入標(biāo)準(zhǔn)檢測包的中心或待滅菌物品包的中心，置于滅菌器的規(guī)定位置。

5.3.3. 按規(guī)定的滅菌溫度和時間進行滅菌處理。壓力蒸汽滅菌器具有造型新穎美觀、結(jié)構(gòu)合理、功能齊全、加熱迅速、滅菌*等優(yōu)點。適用于醫(yī)療、科研、食品、等單位對手術(shù)器械、敷料、玻璃器皿、橡膠制品、食品、藥液、培養(yǎng)基等物品進行滅菌。

5.3.4. 滅菌完畢，即刻將生物指示劑取出，蓋朝上垂直握于手中，用專門工具或夾子夾住菌管下部，將管內(nèi)安瓿擠碎，讓培養(yǎng)液流出浸沒菌片。然后將菌管放于56℃溫箱內(nèi)或配套的微型培養(yǎng)器內(nèi)培養(yǎng)24小時觀察初步結(jié)果，48小時觀察終結(jié)果。

      5.4.  結(jié)果判定：培養(yǎng)后生物指示劑的培養(yǎng)液由紫色變?yōu)辄S色即表示有菌生長、判定為滅菌不合格；仍為紫色者為無菌生長，判定為滅菌合格。

      5.5.  注意事項：

      5.5.1.  生物指示劑管從壓力蒸汽滅菌器內(nèi)取出或從冰箱內(nèi)取出需在室溫下放10min左右，再夾碎安瓿，以免過熱或過冷夾碎外管。

      5.5.2.  恢復(fù)培養(yǎng)液在56℃培養(yǎng)時間過長（72小時以上），陽性管黃色容易消退，培養(yǎng)液逐漸干燥，應(yīng)注意每天觀察，隨時記錄陽性結(jié)果。