液相色譜常用的檢測器分析
微流電動液相色譜系統(tǒng)(eHPLC)是毛細(xì)管電泳和液相色譜的結(jié)合,依靠電滲流和液壓推動流動相,對于復(fù)雜樣品的分析能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)超越單獨(dú)使用HPLC和CE。電滲流的塞型流型改善了樣品分子在色譜柱內(nèi)的流型和峰展寬,可獲得遠(yuǎn)高于液相色譜的柱效。
液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。
(1)紫外檢測器
該檢測器適用于對紫外光(或可見光)有吸收性能樣品的檢測。其特點(diǎn)是,使用面廣(如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用)、靈敏度高(檢測下限為10-10g/ml)、線性范圍寬、對溫度和流速變化不敏感、可檢測梯度溶液洗脫的樣品。
(2)示差折光檢測器
凡具有與流動相折光率不同的樣品組分,均可使用示差折光檢測器檢測。目前,糖類化合物的檢測大多使用此檢測系統(tǒng)。這一系統(tǒng)通用性強(qiáng)、操作簡單,但靈敏度低(檢測下限為10-7g/ml),流動相的變化會引起折光率的變化,因此,它既不適用于痕量分析,也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。
(3)熒光檢測器
凡具有熒光的物質(zhì),在一定條件下,其發(fā)射光的熒光強(qiáng)度與物質(zhì)的濃度成正比。因此,這一檢測器只適用于具有熒光的有機(jī)化合物(如多環(huán)芳烴、氨基酸、胺類、維生素和某些蛋白質(zhì)等)的測定,其靈敏度很高(檢測下限為10-12~10-14g/ml),痕量分析和梯度洗脫樣品的檢測均可采用。