簡(jiǎn)析國(guó)產(chǎn)液相色譜柱的硅膠鍵合相技術(shù)改進(jìn)
簡(jiǎn)析國(guó)產(chǎn)液相色譜柱的硅膠鍵合相技術(shù)改進(jìn)
國(guó)產(chǎn)液相色譜柱由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過(guò)濾片等組成,其中填料為色譜柱的核心部分,科研工作者在填料上發(fā)揮奇思妙想,開(kāi)發(fā)出市面上種類(lèi)繁多的色譜柱,每種色譜柱又有其*的選擇性及應(yīng)用。
國(guó)產(chǎn)液相色譜柱常用填料基質(zhì)為硅膠,硅膠作為基質(zhì)有如下優(yōu)點(diǎn):
無(wú)毒無(wú)味,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定;
具有高機(jī)械強(qiáng)度和高的比表面積;
可利用表面健合反應(yīng)來(lái)廣泛滿(mǎn)足正相、反相、離子交換和體積排阻色譜的需求。
國(guó)產(chǎn)液相色譜柱的硅膠鍵合相技術(shù)改進(jìn):
1.空間位阻
普通的色譜柱在pH<2時(shí)不穩(wěn)定,發(fā)生水解,導(dǎo)致鍵合相流失。當(dāng)我們用異丙基、二異丁基來(lái)取代甲基的話,就在鍵合相上形成一個(gè)保護(hù)層,這樣不僅能抗水解能力(pH1-8),還能防止分離化合物與硅羥基之間的作用,改善峰型。
2.極性嵌入
在碳鏈上鍵合了極性基團(tuán),流動(dòng)相在該基團(tuán)處形成了水屏蔽層媒介,水層間接屏蔽了帶負(fù)電的硅羥基與目標(biāo)分離物接觸可能性,減少與酸、強(qiáng)堿性化合物的吸附,減少了拖尾現(xiàn)象的產(chǎn)生,大大地改善了色譜峰型對(duì)稱(chēng)性。極性嵌入的另外一個(gè)優(yōu)勢(shì)是碳鏈鍵合極性了基團(tuán),表現(xiàn)出對(duì)極性物質(zhì)有更強(qiáng)的選擇。另外,極性嵌入可降低脫水(疏水塌陷)危險(xiǎn),即使在含水量高的流動(dòng)相條件下,樣品也同樣有穩(wěn)定保留和z佳峰形。
3.雙層表面修飾
在硅膠新增加表面層硅羥基活性更低的新硅羥基pH5.2(普通硅羥基pH約為3.5),低表面硅羥基活性,抑制二次保留。
4.雙齒鍵合
鍵合相的兩個(gè)硅原子之間以Si-O-或-CH2-CH2-等基團(tuán)相連,每個(gè)硅原子含有一個(gè)長(zhǎng)鏈硅烷基官能團(tuán)。有效防止了超純硅膠載體在高pH時(shí)的溶解,使其在高pH流動(dòng)相中保持了z佳的穩(wěn)定性,耐受pH達(dá)11.5,特別適用于分離游離的強(qiáng)堿性化合物。
5.雜化技術(shù)
普通硅膠在pH>8的條件下很容易被水解,且僅需要4根Si-OH鍵被水解斷裂后即有1個(gè)單元的氫氧化硅釋放,導(dǎo)致柱效下降;而雜化硅膠需要水解6根Si-OH才可將含有亞乙基橋的硅膠單元溶出,且斷裂的Si-O-Si有可能重新連接。所以雜化顆粒技術(shù)硅膠有較寬的pH及溫度耐受性。如C18柱pH耐受范圍1-12,低pH條件下溫度上限80℃,高pH條件下溫度上限60℃。