毛細管色譜柱選擇時的考慮原則
毛細管色譜柱選擇時的考慮原則
我們可從三點來確定毛細管色譜柱的選型:
一、固定相
色譜理論上講,選擇固定相選擇遵循相似性原則,即用非極性固定相分析非極性物質(zhì),用極性固定相分析極性物質(zhì),用含芳香基團的固定相分析芳香族化合物。在填充柱時代,這個想法是非常正確的,因為那個時候,分離度是首先需要把握的關(guān)鍵因素,分不開,就沒辦法想其它。它的理由在于塔板理論的推論,即組分在固定相中有越大的溶解度,同樣的溶解度差異就會產(chǎn)生越大的分離度。但是在毛細管色譜時代,分離度不再始終是分析的首要問題。毛細管具有幾十萬塊塔板,如此大的柱效率,以至于不再需要充分考慮分離問題了。這個時候,樣品兼容性、使用溫度、穩(wěn)定性、柱流失情況等,都可能成為選擇的主要理由。如分析甲醇乙醇丙醇等低級醇類,正常應(yīng)選擇高極性色譜柱。但是在雜質(zhì)較少的情況下,選擇非極性柱具有更高的靈活性和使用壽命。具體選擇主要依據(jù)以下規(guī)則:
1.因為非極性毛細管柱具有明顯的穩(wěn)定性、高使用溫度、良好的色譜峰型等有利因素,因此易分離物質(zhì)應(yīng)首先選用極性小的色譜柱。
2.分析氫鍵型物質(zhì)用氫鍵型PEG柱更佳。
3.輕烴或*氣體用Plot柱更佳。
4.高苯基固定相對芳香族物質(zhì)保留能力更強。但是分析二甲苯等芳烴異構(gòu)體,應(yīng)選擇強極性色譜柱。
二、柱長
柱長增加一倍,理論塔板數(shù)增加一倍,但同時分析時間也增加一倍,分離度由于與柱長的平方根成正比,因此理論上就只能夠得到0.414倍的增加,但實際得到的收益要更小。雖然如此,在分離度難以達到的時候,選擇更長的毛細管柱,仍然是直接有效的方法。
三、膜厚
膜厚并不能直接影響毛細管柱的理論塔板高度,但他直接影響色譜柱的相比。越大膜厚,色譜柱的柱容量就越大,組分出峰的時間就越晚。在需要更大的進樣量的情況下,選擇厚膜色譜柱;在需要快速分析的情況下,選擇薄膜色譜柱。