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NE-PER NUCLEAR Invitrogen現(xiàn)貨
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NE-PER NUCLEAR Invitrogen現(xiàn)貨
NE-PER NUCLEAR Invitrogen現(xiàn)貨
描述
Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的細(xì)胞裂解和抽提方法，可在兩個小時之內(nèi)完成胞漿蛋白與核蛋白的分離操作。
NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒的特性：
• 快速—在兩個小時之內(nèi)獲得胞核與胞漿內(nèi)的可溶性蛋白組分
• 可靠—NE-PER試劑盒已經(jīng)被950篇以上的發(fā)表文獻(xiàn)引用
• 通用 –適用于培養(yǎng)細(xì)胞或組織（僅適用于新鮮樣本）的核蛋白抽提
• 可擴(kuò)展—兩種規(guī)格試劑盒，滿足從細(xì)胞和組織中抽提樣本的應(yīng)用需求
• 方便—操作簡單，無需超速梯度離心
• 兼容性好—獲得樣本適合于多種下游應(yīng)用，包括免疫印跡、凝膠遷移分析、蛋白分析、報告基因分析以及酶活性分析
NE-PER試劑盒為用戶提供了高效的核蛋白抽提方法，用戶只需擁有臺式微量離心機(jī)、離心管和移液器，進(jìn)行簡單的分步式細(xì)胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可。NE-PER試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分，交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了zui低。一旦經(jīng)過脫鹽或稀釋，分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實驗，如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀(Co-IP)和拉下實驗。
分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多，但大多數(shù)制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時，并需要機(jī)械勻漿、凍融循環(huán)、反復(fù)離心或透析，而這些都可能影響核蛋白的完整性。NE-PER 核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案，能夠分步裂解細(xì)胞并從胞漿中分離出完整的細(xì)胞核，然后再從基因組DNA與mRNA中抽提核蛋白。這一溫和的過程可在兩小時之內(nèi)完成，且使用培養(yǎng)細(xì)胞時僅需標(biāo)準(zhǔn)的桌臺式離心機(jī)即可。此外，用戶還可以從細(xì)胞培養(yǎng)物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白。
本試劑盒能夠從兩百萬個細(xì)胞中提出200至500µg胞漿蛋白和100至200µg的核蛋白（濃度為1mg/mL）。一般情況下，胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在10%左右。本方法分離得到的主要是細(xì)胞核中的可溶蛋白，而非與染色質(zhì)結(jié)合的蛋白或核膜整聯(lián)蛋白?？赏ㄟ^調(diào)整核抽提試劑（NER）的體積來改變胞核抽提物的蛋白濃度，而不會對抽提效率造成顯著影響。從細(xì)胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調(diào)控研究的關(guān)鍵，然而現(xiàn)有的許多分離細(xì)胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時，且需要進(jìn)行機(jī)械勻漿、凍融循環(huán)、重復(fù)離心或透析等操作，對許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響。NE-PER試劑盒能夠克服這些問題，通過EMSA及其他分析技術(shù)為用戶提供高質(zhì)量的濃縮核蛋白抽提物。
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