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微生物量氮的測定—消煮、堿化蒸餾法|茁彩生物
閱讀:48 發(fā)布時(shí)間:2025-2-10微生物量氮(MBN)是指土壤中體積小于5000μm3的活體和死體生物體(不含活體植物根系)內(nèi)氮的總和。它是土壤氮素的一個(gè)重要儲備庫,也是土壤有機(jī)氮中最為活躍的組分,在土壤氮循環(huán)與轉(zhuǎn)化過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用。測定土壤微生物量氮,可為研究土壤中氮的養(yǎng)分轉(zhuǎn)化和循環(huán)以及在土壤肥力中的作用提供可靠依據(jù)。
目前,微生物量氮的測定方法主要有消煮、堿化蒸餾法,該方法在檢測時(shí),先吸取浸提液25-30ml放入開氏瓶中,加入2ml濃硫酸(固定浸提液中的氨)。放入烘箱在60-70℃烘干2-3天,直至瓶內(nèi)還剩下3ml左右溶液,取出。加入3ml濃硫酸和1ml 0.19 mol·L-1 CuSO4溶液,放上小漏斗在電爐上進(jìn)行消煮。消煮至瓶內(nèi)顏色呈天藍(lán)色為止,取下冷卻。同時(shí)用0.5mol L-1 K2SO4 溶液50ml代替浸提液作為空白對照。 用去離子水清洗小漏斗內(nèi)外壁,少量多次沖洗開氏瓶,將開氏瓶中的液體全部轉(zhuǎn)移到定氮儀中,加入20ml 10mol L-1 NaOH 溶液進(jìn)行堿化蒸餾,冷凝管下口放裝有5ml硼酸指示劑的小三角瓶,接受蒸餾液,待蒸餾液達(dá)到60ml時(shí),停止蒸餾。蒸餾前應(yīng)檢查蒸餾裝置是否漏氣,并進(jìn)行空蒸餾清洗管道。 用0.02 mol L-1 硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定蒸餾液,加入指示劑,顏色由藍(lán)色剛變?yōu)樽霞t色為終點(diǎn),記錄消耗硫酸標(biāo)液的體積。
結(jié)果計(jì)算:
(1)N(ug/g)=[(V-V0)*NH2SO4*14.0*稀釋倍數(shù)*1000*2.22]/W干土
(2)微生物量氮BN(ug/g)=N熏蒸-N未熏蒸 其中: V:滴定樣本所消耗的硫酸體積,ml; V0:滴定空白樣本所消耗的硫酸體積,ml; 稀釋倍數(shù):總浸提液是所吸取的浸提液的倍數(shù); 2.22:無機(jī)氮轉(zhuǎn)化為有機(jī)氮的轉(zhuǎn)化系數(shù)。
注意事項(xiàng):
在實(shí)驗(yàn)過程中,要確保所有玻璃器皿干凈無污染。
消煮和蒸餾過程中要嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間。
滴定終點(diǎn)要準(zhǔn)確判斷,避免誤差。
空白實(shí)驗(yàn)是確保結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟,不可忽視。