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赤霉素檢測|茁彩生物
閱讀:70 發(fā)布時間:2025-1-7赤霉素是由四環(huán)骨架衍生而得的二萜類酸的植物激素,廣泛分布于高等植物、藻類、真菌及細菌中。赤霉素是種類最多的植物激素,在同一植物中往往出現(xiàn)多種赤霉素并存的現(xiàn)象。它們有共同的基本骨架—赤霉烷,結構也非常相似,僅在羧基數(shù)目和位置上有差異,但它們的生物活性不同,在生物體內的作用也大不相同。
目前已鑒定出130多種不同結構的GA。按照發(fā)現(xiàn)的先后順序,將其依次命名為GA1、GA2……,它們統(tǒng)稱赤霉素類 (GAs),其中GA1,GA3,GA4和GA7的生物活性最高。
赤霉素的合成途徑:
起始階段(在質體中)
前體物質:赤霉素的合成以牻牛兒基牻牛兒基焦磷酸(GGDP,也有資料稱為牻牛兒基牻牛兒基二磷酸或GGPP)為前體。
關鍵酶:通過CPS(ent-copalyl diphosphate synthase,內根-古巴焦磷酸合成酶)和KS(ent-kaurene synthase,內根-貝殼杉烯合酶)的催化。
產(chǎn)物:生成內根-貝殼杉烯(ent-kaurene)。
中間階段(在內質網(wǎng)上)
反應過程:內根-貝殼杉烯經(jīng)過一系列氧化反應,首先生成GA12-醛。
關鍵酶:涉及多種酶,包括內根-貝殼杉烯氧化酶(KO,也有資料稱為內根-貝殼杉烯19-氧化酶EKO)和內根-貝殼杉烯酸氧化酶(KAO)。但需要注意的是,這里并不特指細胞色素P450酶,盡管細胞色素P450酶在某些生物合成途徑中可能發(fā)揮作用,但在赤霉素合成的這一階段,并非主要由細胞色素P450酶催化。
中間產(chǎn)物:GA12-醛再經(jīng)過轉化形成GA12和GA53,其中GA53是由GA12在GA13氧化酶的作用下衍生而來的。
末端階段(在細胞質中)
反應過程:在細胞質中,GA12和GA53經(jīng)過C20處的系列氧化反應,最終形成其他種類的赤霉素(GAs)。
關鍵酶:由GA20-oxidase、GA3-oxidase和GA2-oxidase三種氧化酶催化。
產(chǎn)物:具有較高生物活性的赤霉素,如GA1、GA4等。
赤霉素信號轉導途徑
受體識別:赤霉素的受體是GID1蛋白。當細胞外GA濃度升高時,活性GA與GID1結合,被GID1封閉在其內部。
DELLA蛋白的降解:GID1與GA結合后,其構象發(fā)生改變,能夠與DELLA蛋白的N端結合。這種結合促使DELLA蛋白發(fā)生構象變化,進而與SCF(Skp1/Cullin/F-box)復合體相互作用。SCF復合體中的F-box蛋白(如SLY1/GID2)識別并結合DELLA蛋白的C端,促進DELLA蛋白的多泛素化。最終,泛素化的DELLA蛋白被26S蛋白酶體降解。
GA信號的釋放:DELLA蛋白的降解解除了其對植物生長的抑制作用,使得GA信號得以釋放并發(fā)揮生理促進作用。
赤霉素功能:
解除種子休眠,促進種子萌發(fā)
緩解逆境脅迫
提高抗倒伏性
促進細胞伸長
調節(jié)開花和結實
促進果實發(fā)育
赤霉素的檢測方法主要有氣相色譜-質譜聯(lián)用 (GC-MS)、液相與質譜聯(lián)用方法(LC-MS/MS法)等。LC-MS分離能力強、操作簡便,又避免了氣相色譜繁瑣的衍生化,還兼具質譜法的靈敏和準確,被廣泛應用于蔬菜、水果、茶葉、保健品等產(chǎn)品中赤霉素的測定。