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什么是植物細(xì)胞程序性死亡的TUNEL檢測？
閱讀：89 發(fā)布時(shí)間：2024-6-6植物細(xì)胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）是植物生長發(fā)育過程或環(huán)境脅迫下，由基因調(diào)控主動(dòng)移除多余的、受傷細(xì)胞的過程。PCD 從胚胎發(fā)生一直到個(gè)體的死亡，伴隨植物生長發(fā)育的每個(gè)階段，包括胚胎發(fā)育過程中胚柄細(xì)胞的移除、單子葉植物種子萌發(fā)過程中糊粉層的解體、木質(zhì)部管狀分子的分化、通氣組織和表皮毛的形成、性別的決定、花藥絨氈層的降解、花器官的脫落、花粉的自交不親和、葉片形狀的重構(gòu)和葉子的衰老等。
同時(shí)，PCD 也參與了植物的免疫反應(yīng)和對(duì)環(huán)境信號(hào)的應(yīng)答，如真菌入侵后的超敏反應(yīng)；高濃度鹽、溫度、重金屬離子、紫外線等均能誘導(dǎo)植物 PCD。植物 PCD 過程中，會(huì)表現(xiàn)出細(xì)胞核的凝聚、DNA 的片段化、細(xì)胞質(zhì)凝集和質(zhì)膜塌陷等現(xiàn)象。其中細(xì)胞核的變形及 DNA 的片段化是 PCD 過程的關(guān)鍵特征。因此，利用 4'，6-蘇基-2-苯基吲哚（DAPI）標(biāo)記和末端脫氧核糖核苜酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）介導(dǎo)的脫氧核昔酸缺口末端標(biāo)記法（TUNEL 檢測），可觀察到 PCD 過程中，細(xì)胞核的形態(tài)變化及 DNA 的片段化。基因組 DNA 會(huì)發(fā)生斷裂降解，會(huì)產(chǎn)生的一系列 DNA 的 3'-OH 端。在末端脫氧核糖核昔酸轉(zhuǎn)移酶的作用下，可將脫氧核糖核昔酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸化酶形成的衍生物標(biāo)記到 DNA 的 3'-OH 端，在熒光顯微鏡下可觀察到熒光。
花蜜腺是分布于花器官中的一類分泌糖類的腺體，用于吸引昆蟲傳粉。當(dāng)完成傳粉后，部分植物的蜜腺也失去存在的意義，因此，蜜腺會(huì)通過 PCD 途徑而逐漸解體。圓葉牽牛分布廣泛，花期短，其花蜜腺是檢測 PCD 特征理想材料。