產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):HCV復(fù)制小分子抑制劑(Anguizole)
英文名稱(chēng):Anguizole
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Anguizole是HCV復(fù)制的小分子抑制劑,能改變NS4B的亞細(xì)胞分布。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):442666-98-0 分子量:408.81 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Notopterolmyocardin相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝25g
山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷英文名稱(chēng): 10-Hydroxydecanoic acid金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體包裝500g
山香圓葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hydroxysafflor yellow A絲裂原活化蛋白激激8抗體包裝5g
山藥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Aristolochic Acid Ia磷化絲裂原活化蛋白激激8抗體包裝500mg
山銀花(灰氈毛忍冬)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Madecassoside磷化絲裂原活化蛋白激激8抗體包裝25g
山楂(山里紅)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Madecassic acid促進(jìn)調(diào)解蛋白家族2A抗體包裝5g
山楂(山楂)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Madecassic acid黑色瘤抑制活性蛋白2抗體包裝1g
山楂,馬斯里(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hecogenin腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1包裝25g
山楂葉(山里紅)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ganoderic acid B肌球蛋白輕鏈激抗體包裝5g
山芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): IsoschaftosideMYCBPAP抗體包裝1g
山梔苷酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Carbamyl-β-methylcholine chloride 組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體包裝5g
山茱萸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Solanesol線(xiàn)粒體核糖體蛋白S22抗體包裝250mg
山茱萸新苷I英文名稱(chēng): Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside棕櫚?;さ鞍?抗體包裝1g
珊瑚菜內(nèi)酯,珊瑚菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Fraxin小鼠抗單克抗體包裝5g
珊瑚姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Esculin肌球蛋白輕鏈1/3抗體包裝1g
膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:BR,培養(yǎng)級(jí);Anti-factor Xa activity(dried substance):90.0~125.0IU/mg;Anti-factor Ⅱa activity(dried substance) :20.0~35.0IU/mg。符合USP35標(biāo)準(zhǔn)抗α干擾抗體試劑盒對(duì)氧基;Anisic aldeh
: S952資源名稱(chēng): 布倫登盧普沙門(mén)氏菌 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定抗α-胞襯蛋白抗體試劑盒地榆皂苷Ⅱ;Ziyuglycoside
麥根腐平臍蠕孢Bipolaris│sorokiniana 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定抗UACA抗體試劑盒地榆皂苷Ⅰ;Ziyu-glycoside
HCV復(fù)制小分子抑制劑(Anguizole)酯封端左旋聚乳(重均分子量170-206萬(wàn))Human, Mouse, Rat
酯封端左旋聚乳(重均分子量206-288萬(wàn))Human
酯封端左旋聚乳(重均分子量26-36萬(wàn))Human, Mouse, Rat
酯封端左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬(wàn))Human
酯封端左旋聚乳(重均分子量36-48萬(wàn))Human, Mouse
酯封端左旋聚乳(重均分子量48-73萬(wàn))Human
酯封端左旋聚乳(重均分子量5.5-9 萬(wàn))Human, Mouse, Rat
酯封端左旋聚乳(重均分子量73-102萬(wàn))Human
酯封端左旋聚乳(重均分子量9-17萬(wàn))Human
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)