以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CRF1受體激動(dòng)劑 | Corticotropin-releasing factor ovine | 500ug|1mg|5mg|10mg | 1~3天 |
商品介紹:
Corticotropin-releasing factor(ovine),優(yōu)先的CRF1受體的激動(dòng)劑,對(duì)于CRF1的親和力是CRF2的200倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):79804-71-0 別名:Ovine CRF;Ovine corticotropin-releasing factor;Corticorelin 純度:98.12% 分子量:4670.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP2 ELISA Kit
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA檢測(cè)試劑盒Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T
犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)免疫試劑盒 Dog Pancreatic iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit
英文名稱(chēng)MouseAβ1-40proteinELISAKit小鼠Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T
丙同酸待測(cè)樣品處理試劑盒20次
RatFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA試劑盒大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素3(IL3)ELISA試劑盒 ,英文名: IL3 ELISA Kit
人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaetinolbindingprotein,RBPELISAKit 96T/48T
大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)免疫試劑盒 Rat ai-Endomysial Aibody IgA,EMA IgA ELISA Kit
英文名稱(chēng)RatC5aELISAKit大鼠補(bǔ)體片斷C5a(C5a)規(guī)格:96T/48T
酒類(lèi)氨熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitBRCA-1人癌易感蛋白1規(guī)格:48T/96T
豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human melanocyte aibody (MC Ab) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒
RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠELISAKit 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforApoC3(HumanApolipoproteinC3)ELISAKit人載脂蛋白C3規(guī)格:48T/96T
血清/血漿總膽汁酸酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
PorcineKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISAKit豬角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CRF1受體激動(dòng)劑SCG10 英文名稱(chēng): 神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白SCG10抗體 0.1ml
EDA 英文名稱(chēng): 外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體 0.2ml
X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體 anti-XIAP 0.2ml
Anti-TSLC1/FITC 熒光素標(biāo)記肺癌阻抑基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(Ser466) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格 0.1ml
TrK A.B.C 神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg