商品介紹:
Daclatasvir是一種有效的HCV NS5A抑制劑,作用于基因型1a和1b復(fù)制子,平均EC50為50和9pM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1009119-64-5 別名:BMS-790052;EBP 883 純度:99.31% 分子量:738.88 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol磷化糖皮質(zhì)激受體抗體包裝25g
人參皂苷Rh3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體包裝5g
人參皂苷Rh7(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam糖皮質(zhì)激受體β抗體包裝100g
人參皂苷Rh8(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: p-Anisic Acid胰島葡萄糖6磷2抗體包裝25g
人參皂苷Rk1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 9-Anthracenecarboxylic Acid葡萄糖氧化抗體包裝5g
人參皂苷Rk2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin葡萄糖苷2β/Glucosidase IIβ抗體包裝5MG
人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Naphthoyl Chloride谷脫氫2抗體包裝10MG
人參皂苷Ro(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-Dimethylaminocinnamaldehyde磷化谷受體1抗體包裝1g
人工虎骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydrideγ-谷酰解抗體包裝250mg
人工牛黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine谷酰-脯酰-tRNA合成抗體包裝100g
忍冬藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白2抗體包裝25g
絨毛龍芽草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白5抗體包裝5g
鞣花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: α-Thioglycerol 谷胱甘肽過氧化2抗體包裝100g
肉蓯蓉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid 谷胱甘肽過氧化7抗體包裝25g
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic Acid谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移α1抗體包裝5g
: CGMCC1.458資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于培養(yǎng)尿激試劑盒雷酚內(nèi)酯;Triptophenolide
稻麥角菌Claviceps│oryzae-sativae 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移試劑盒藍(lán)萼;Glaucocalyxin A
節(jié)桿菌Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿苷二磷葡萄糖轉(zhuǎn)移2試劑盒蘆竹堿;Gramine
HCV NS5A抑制劑(Daclatasvir)一氧化氮合轉(zhuǎn)運(yùn)誘導(dǎo)抗體異水飛薊賓 alpha-Asarone
中性鞘磷脂相關(guān)因子抗體異土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Dioxopromethazine hydrochloride
人白介3介導(dǎo)核因子抗體異夏佛塔苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderal A
SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體異型南五味子丁(標(biāo)準(zhǔn)品) Astemizole
轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體異櫻花;異櫻花亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Eltrombopag (SB-497115)
NPIP樣蛋白1抗體異澤蘭黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Capsazepine
老年性癡呆蛋白APH2抗體異紫花前胡內(nèi)酯 Amiloride hydrochloride
神經(jīng)凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體(前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9)益母草(標(biāo)準(zhǔn)品) Amiloride hydrochloride
G蛋白偶聯(lián)受體147抗體益智(益智仁)(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate