商品介紹:
INT-777是一種有效的TGR5激動(dòng)劑,EC50值為0.82μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1199796-29-6 別名:S-EMCA 純度:98.0% 分子量:450.65 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:TGR5激動(dòng)劑(INT-777)
英文名稱:INT-777
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
3'-氧基葛根英文名稱: Tween-80類表皮生長(zhǎng)因子域7抗體包裝100g
3'-牻牛兒基-3-異戊烯基-5,7,2',4'-四羥...英文名稱: Tween-80α彈性蛋白抗體包裝25g
3'-羥基葛根英文名稱: Potassium-D-gluconate黃熱病包膜糖蛋白抗體包裝500g
3'-羥基紫檀茋英文名稱: PF562271HER2受體抗體包裝1g
3,29-二?;闃侨嗜?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium alginate from brown;Algin轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體包裝250mg
3,3'-二基鞣花-4'-O-葡萄糖苷英文名稱: Collagenase, Type1磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g
3,6-二芥子?;崽牵?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Collagenase, Type2磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝1g
3-(3-羥基基)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Collagenase, TypeIV磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g
3-Deoxyaconitine英文名稱: Sodium molybdate磷化埃茲蛋白抗體包裝100g
3-O-Acetyl-16α-hydroxytrame...英文名稱: Magnesium silicate磷化埃茲蛋白抗體包裝25g
3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李...英文名稱: Sodium L-ascorbate磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體包裝10MG
3-O-乙?;?16α-羥基松苓新英文名稱: Sodium pyrophosphate磷化酪蛋白激A2受體抗體包裝1g
3’-氧基芹菜苷;柯伊利-7-O-葡萄糖-2-O-...英文名稱: Ammonium bicarbonateEphrin B抗體包裝1g
3β,7β,12β-三羥基-11,15-二羰基-羊毛甾...英文名稱: Ammonium chloride磷化Ephrin B抗體包裝1g
3β,7β,15β-三羥基-11-羰基-羊毛甾烷-8-...英文名稱: Salicylic acid磷化Ephrin B抗體包裝25g
海芽孢桿菌Bacillus│aquimaris 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胎兒纖連蛋白試劑盒瑞香二;7,8-dimethoxy
: =IFFI13038資源名稱: 綠色木霉=木木霉 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR,BP2010鎖鏈試劑盒瑞香-7-;Daphnetin 7
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品羧基賴試劑盒人參皂苷Rk3;Ginsenoside
TGR5激動(dòng)劑(INT-777)鋅指蛋白354C抗體大豆 DAIDZEIN(AS)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白312抗體大豆 DAIDZEIN(AS)Human
鋅指脂蛋白抗體大豆 DAIDZEIN(AS)Human, Mouse, Rat
鋅指脂蛋白-1c抗體大豆 DAIDZEIN(AS)Human
鋅指蛋白ZIC5抗體硅藻黃色 DIADINOXANTHIN(SH)Human, Mouse
AN1型鋅指蛋白5抗體胞苷 5'-磷二鈉鹽 CYTIDINE-5'-MONOPHOSPHATE DISODIUM SALT(SH)Human
胎蛋白調(diào)節(jié)蛋白1抗體胞苷 5'-單磷 CYTIDINE-5'-MONOPHOSPHATE(P)Human
凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體胞苷 5'-單磷 CYTIDINE-5'-MONOPHOSPHATE(P)Human, Mouse
鋅指蛋白754抗體胞啶 3'-單磷 CYTIDINE-3'-MONOPHOSPHATE(AS)Human, Mouse