公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):肥大細(xì)胞染色液(阿利新藍(lán)沙黃法)
英文名稱(chēng):
產(chǎn)品規(guī)格:3×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 肥大細(xì)胞脫顆粒染色 注意事項(xiàng): 幼稚型肥大細(xì)胞顆粒呈藍(lán)色,成熟些肥大細(xì)胞顆粒呈紅色。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
山姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Bathophenanthroline (purified by sublimation)轉(zhuǎn)錄因子Gli3抗體包裝5g
山橿根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): BathocuproineGLIS2蛋白抗體包裝100g
山臘梅葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Neocuproine Hemihydrate鳥(niǎo)苷環(huán)化激活蛋白1抗體包裝25g
山蠟梅堿英文名稱(chēng): BathophenanthrolineGSK3B相互作用蛋白抗體包裝5g
山綠茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 4,7-Dihydroxy-1,10-phenanthroline高爾基體膜相關(guān)蛋白6抗體包裝1g
山麥冬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate 高爾基體自身蛋白GM130抗體包裝5g
山麥冬皂苷B英文名稱(chēng): 1,10-Phenanthroline-5,6-dione糖代謝相關(guān)蛋白1抗體包裝100mg
山麥冬皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): TPP (=Tetraphenylporphyrin) G蛋白偶聯(lián)受體64抗體包裝500mg
山麥冬皂苷J英文名稱(chēng): TCPP [=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin] γ基丁受體相關(guān)蛋白樣1抗體包裝100g
酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Azomethine H 法尼基二磷合1抗體包裝25g
酚-3-O-β-D-槐糖苷;酚-3-O-槐糖苷英文名稱(chēng): N-Methylfurohydroxamic Acid 鳥(niǎo)嘌呤核苷結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
酚-4’-O-葡萄糖苷;酚-4’-O-β-D-...英文名稱(chēng): 2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate 膠質(zhì)纖維性蛋白GFAPδ抗體包裝25g
酚-7-O-葡萄糖苷英文名稱(chēng): Chloranilic Acidβ半乳糖苷抗體包裝5g
苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pyrogallol Red巨軸索蛋白GAN抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): ZinconG蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體包裝5g
柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品難辨梭狀芽孢桿菌A試劑盒麗江;Foresaconitine
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Bacillus│thuringiensis subsp. galleriae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR鈉-化物依賴(lài)性?;寝D(zhuǎn)運(yùn)體試劑盒雷公藤內(nèi)酯;Tripchloroli
白色假絲酵母菌Candida│albicans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鈉離子通道蛋白抗體藜蘆;3,4-Dimethoxyben
肥大細(xì)胞染色液(阿利新藍(lán)沙黃法)北京擲孢酵母 8-氯喹林L-肌肽Elisa
*蛹蟲(chóng)草 5-乙硫基四氮唑含WD重復(fù)域蛋白89Elisa
華特拉根瘤 鄰氯氯芐巴爾通體IGG抗體Elisa
宇佐美曲霉 2-氧代環(huán)戊羧酸乙酯巴爾通體IGM抗體Elisa
枯草芽胞桿枯草亞種 2-異基苯酸胸腺因子Elisa
灰色鏈霉灰色亞種 甲酸鋰一水合物輕肽神經(jīng)絲蛋白Elisa
Bacillus aryabhattai 乙基三苯基氯化膦蔗糖異麥芽糖Elisa
馬賽 2,3,4-三氟蔗糖異麥芽糖Elisa
芽胞桿 2',4'-二氯代苯戊酮硫酸酯1Elisa
阿氏葡萄球 5-溴-2-羥基-3-甲基吡啶硫酸酯1Elisa
釀酒酵母 4-硝基鄰苯二甲酸二甲酯硫酸酯修飾因子1Elisa
少孢根霉 2,3,4-三羥基亞硫酸鹽氧化Elisa
德式乳桿乳酸亞種 (R)-(-)-1-芐氧基-2-亞硫酸鹽氧化Elisa
多源中間根瘤 鄰甲氧基肉桂酸17-羥基孕烯酮Elisa
釀酒酵母 鹽酸馬尼地平CD134分子Elisa