以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
NOX1/4抑制劑(GKT137831) | GKT137831 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
商品介紹:
GKT137831是一種新型特異性的NADPH氧化酶(NOX1/4)抑制劑。GKT137831有效作用于人Nox4和Nox1,Ki分別為140±40nM和110±30nM,而作用于Nox2和Nox5,Ki分別為1750±700nM和410±100nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1218942-37-0 純度:99.43% 分子量:394.85 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA Kit英文名稱:PⅢNP ELISA Kitβ分泌抗體包裝5g
Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)ELISA Kit英文名稱:PⅢNT ELISA Kit相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體包裝100ml
Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)ELISA Kit英文名稱:HPCⅢ ELISA KitBax包裝25ml
Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA Kit英文名稱:Col Ⅲ ELISA Kit程序性死亡配體2抗體包裝500ml
Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA Kit英文名稱:HELIX-Ⅱ ELISA Kit膽汁鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11抗體包裝1g
Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA Kit英文名稱:CTX-Ⅱ ELISA Kitβ2微球蛋白抗體(單抗)包裝1g
Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA Kit英文名稱:ColⅡ ELISA Kit骨/軟骨蛋白多糖1抗體包裝5g
Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit英文名稱:Col Ⅱ ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白CAP抗體包裝1g
Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA Kit英文名稱:PⅠCP ELISA KitBcl-2同源結(jié)構(gòu)域樣蛋白1抗體包裝250mg
Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA Kit英文名稱:PⅠNP ELISA KitBcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體包裝10g
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA Kit英文名稱:CⅠCP ELISA Kit半乳糖轉(zhuǎn)移7亞基β1,4抗體包裝50g
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA Kit英文名稱:ⅠCTP ELISA KitBEN結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝100g
Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA Kit英文名稱:NTX ELISA Kit巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體包裝25g
Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA Kit英文名稱:CTX-Ⅰ ELISA Kit癌相關(guān)蛋白1抗體包裝500g
Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA Kit英文名稱:ColⅠ ELISA Kit腦蛋白CG6抗體包裝1g
膽汁結(jié)合蛋白DDH2抗體促狀腺胚胎因子(TEF)PX-478 是有抗癌活性的缺氧誘導(dǎo)因子-1α (HIF-1α) 抑制劑,對(duì)一些癌系 IC50 為 20-30 μM。
NOX1/4抑制劑(GKT137831)絲/蘇蛋白激SRPK7抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(SH)Human, Rat
磺葡糖硫抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(P)Human, Mouse, Rat
免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(P)Human, Mouse, Rat
痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體寶藿苷 I BAOHUOSIDE I(P)Human, Mouse, Rat
G蛋白結(jié)合蛋白3抗體寶藿苷 I BAOHUOSIDE I(P)Human, Mouse, Rat
SPG48蛋白抗體 BENZALDEHYDE(SG)Human, Mouse
痙攣性截癱蛋白7/質(zhì)粘附調(diào)節(jié)蛋白抗體 BENZALDEHYDE(SG)Human, Mouse
非紅血影腦蛋白β2/spectrin β III抗體補(bǔ)骨脂黃 A BAVACHININ A(SH)Human, Mouse, Rat
腦磺轉(zhuǎn)移樣蛋白4A1抗體補(bǔ)骨脂黃 A BAVACHININ A(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse