詳細介紹
商品介紹:
ACT-132577是macitentan的主要活性代謝物,為ETA/ETB雙重抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1103522-45-7 純度:96.0% 分子量:546.19 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:ACT-132577
產品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
普拉格雷(標準品)英文名稱: Monukast sodiumDENND1B蛋白抗體包裝25ml
普拉克索堿(標準品)英文名稱: Monukast sodiumDEPTOR蛋白抗體包裝5ml
普拉洛芬(標準品)英文名稱: β - Glucanase耳聾常染色體顯性遺傳相關蛋白1抗體包裝100g
普盧利沙星;普利沙星(標準品)英文名稱: bivudine短鏈脫氫/還原家族9抗體包裝25g
普侖司特(標準品)英文名稱: bivudine短鏈脫氫還原13抗體包裝1g
普羅布考(標準品)英文名稱: Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane視網膜短鏈脫氫/還原家族7抗體包裝25g
普瑞巴林(標準品)英文名稱: Raltitrexed短鏈脫氫/還原家族X抗體包裝5g
七烷(標準品)英文名稱: L-Ornithine L-aspartate salt短鏈脫氫/還原家族4抗體包裝100ml
齊多夫定(標準品)英文名稱: Dipyridamole干擾腎癌蛋白2抗體包裝25ml
齊留通(標準品)英文名稱: TamibaroteneDGCR2蛋白抗體包裝500ml
茜(標準品)英文名稱: Vindoline短鏈脫氫/還原家族7C抗體包裝100ml
強力霉堿(標準品)英文名稱: Rhodamine B松果體N基乙酰羥色抗體包裝500ml
羥酯(對羥基酯)標準品英文名稱: Cefoperazone Acid短鏈脫氫還原1抗體包裝100ml
羥磺鈣(標準品)英文名稱: Cefoperazone AcidDNAJC7蛋白抗體包裝1g
羥酯鈉(對羥基酯鈉)(標準品)英文名稱: Rhodamine 6G動力結合蛋白DNMBP抗體包裝100g
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品五聚3試劑盒石蒜裂堿;Lycorenine
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規(guī)格:>98.5%,CP2005,BR,可用于培養(yǎng)無花果2試劑盒四氫非洲防己堿;Tetrahydroco
棲藻海桿菌Marinobacter│algicola 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品烏頭2試劑盒三尖杉酯堿;Harringtonine
ETA/ETB雙重抑制劑(ACT-132577)小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體胡黃連苷 II(標準品)Human, Mouse
人胸表達趨化因子胡黃連苷 III(標準品)Human
人B-淋巴趨化因子胡黃連苷IVHuman
小鼠磷脂酰絲胡黃連苷I(標準品)Human, Mouse, Rat
兔子轉化生長因子β胡椒(白胡椒)(標準品)Human, Mouse, Rat
魚促上腺皮質激胡椒(黑胡椒)(標準品)Human, Mouse, Rat
大鼠可溶性凋亡相關因子胡椒(標準品)Human, Mouse, Rat
人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒胡蘿卜苷(標準品)Human, Mouse
小鼠膽磷甘油酯胡麻屬苷(標準品)Human, Mouse