商品介紹:
SMI-16a是選擇性的Pim激酶抑制劑,對(duì)Pim1,Pim2和PC3細(xì)胞的IC50值分別為0.15,0.02和48μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):587852-28-6 別名:PIM1/2 Kinase Inhibitor VI 純度:98.0% 分子量:263.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Pim激酶抑制劑(SMI-16a) | SMI-16a | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
前動(dòng)力蛋白2(PK2)ELISA Kit英文名稱(chēng):PK2 ELISA Kit周期依賴(lài)性激7抗體包裝1g
前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9(PCSK9)ELISA Kit英文名稱(chēng):PCSK9 ELISA Kit周期依賴(lài)性激8抗體包裝25g
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)ELISA Kit英文名稱(chēng):GLUT4 ELISA Kit周期蛋白依賴(lài)激抑制因子1C抗體包裝5g
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)ELISA Kit英文名稱(chēng):GLUT2 ELISA KitⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝1g
葡萄糖苷β(GUSβ)ELISA Kit英文名稱(chēng):GUSβ ELISA Kitc-fos抗體包裝25g
葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)ELISA Kit英文名稱(chēng):GPI ELISA Kit嗜鉻粒A抗體包裝5g
平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)ELISA Kit英文名稱(chēng):ACTα2 ELISA KitCGRP降鈣基因相關(guān)肽抗體包裝500mg
皮質(zhì)(CORT)ELISA Kit英文名稱(chēng):CORT ELISA KitChAT膽堿乙酰轉(zhuǎn)移抗體包裝1g
皮質(zhì)結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA Kit英文名稱(chēng):CBG ELISA Kit周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g
皮膚橋蛋白(DPT)ELISA Kit英文名稱(chēng):DPT ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體包裝1g
旁血小板溶蛋白(PPL)ELISA Kit英文名稱(chēng):PPL ELISA Kit抗菌肽/天蠶抗體包裝5g
紐蛋白(VCL)ELISA Kit英文名稱(chēng):VCL ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)蛋白激IG抗體包裝25g
牛血清白蛋白(BSA)ELISA Kit英文名稱(chēng):BSA ELISA Kit表面趨化因子受體8抗體包裝5g
Ⅻ(F12)ELISA Kit英文名稱(chēng):F12 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2抗體包裝250mg
ⅩⅢB肽(F13B)ELISA Kit英文名稱(chēng):F13B ELISA Kit胱硫γ裂解抗體包裝1g
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6試劑盒植鋅;Zinc Phytate
假結(jié)核耶爾森氏菌Yersinia│pseudotuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>98% 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1試劑盒植鈉;Sodium phytate
擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98% ,標(biāo)準(zhǔn)品腫瘤壞死因子受體超家族成員18試劑盒植鈣;Calcium phytate
Pim激酶抑制劑(SMI-16a)糖轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Fluazifop-P-butyl solution
環(huán)指蛋白27抗體姜(標(biāo)準(zhǔn)品) Famoxadone solution
透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體降二氫辣椒 Flufenoxuron
G蛋白偶聯(lián)受體激6抗體降香(標(biāo)準(zhǔn)品) Fomesafen
Rho GTP激活蛋白26抗體膠蒼術(shù)甙,羧蒼術(shù)苷二鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutolanil
G蛋白α抑制蛋白1抗體焦地黃乙甙A1 Flusilazole
生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6抗體焦地黃乙甙B1 Fipronil
谷胱甘肽合成抗體焦性沒(méi)食子(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenobucarb
血型糖蛋白δ抗體絞股藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenpyroximate