二氫葉酸還原酶抑制劑(Trimetrexate)公司*的產(chǎn)品：Anti-IL-15/FITC 熒光素標記白介素15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PTP-1B/FITC 熒光素標記PTP-1B蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh APG7/ATG7 自噬相關(guān)蛋白7

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：二氫葉酸還原酶抑制劑(Trimetrexate)

英文名稱：Trimetrexate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

松蘿(標準品)英文名稱： Proteinase K乙酰肝2抗體包裝5g

松蘿；D-地衣(標準品)英文名稱： Proteinase K人血清抗體包裝1g

松塔（標準品）英文名稱： Chymostatin血紅氧合 1/熱休克蛋白32抗體包裝5g

松葉（標準品）英文名稱： Leupeptin 磷化HER3受體抗體包裝1g

松脂二葡萄糖苷（標準品）英文名稱： Pepstatin A microbial磷化組蛋白去乙酰化4/5/7抗體包裝1g

松脂;松脂酚,松脂(標準品)英文名稱： L-(-)-Fucose 異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體包裝100g

松脂二英文名稱： Pectinase組蛋白H1抗體包裝25g

蘇合香（標準品）英文名稱： beta-Amylase組蛋白去乙?；?抗體包裝5g

蘇木（標準品）英文名稱： beta-AmylaseHAUS3蛋白抗體包裝25g

漿苦味L（標準品）英文名稱： Deoxyribonuclease熱休克蛋白93抗體包裝5g

棗仁（標準品）英文名稱： Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 磷化組蛋白去乙?；?抗體包裝25g

棗仁皂苷A(標準品)英文名稱： Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 組蛋白H2B抗體包裝5g

棗仁皂苷B(標準品)英文名稱： Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase短鏈L-3羥烷基脫氫抗體包裝1g

蒜（標準品）英文名稱： Bromelain from pineapple stem 組蛋白去乙?；?抗體包裝5g

穗花杉雙黃（標準品）英文名稱： Thiamine pyrophosphate組蛋白去乙酰化10抗體包裝1g

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于培養(yǎng)膜聯(lián)蛋白Ⅶ試劑盒化矢車菊;Cyanidin Chlo

成對桿菌Dyadobacter│alkalitolerans 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品膜聯(lián)蛋白Ⅵ試劑盒酪;4-Hydroxyphenethy

蓋孔菌Filoboletus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR膜聯(lián)蛋白Ⅴ試劑盒胡黃連苷III;Picroside II
二氫葉酸還原酶抑制劑(Trimetrexate)胰輔脂抗體L-狀腺(標準品) Adenine

17號染色體開放閱讀框104抗體L-狀腺鈉(標準品) Erythromycin ethylsuccinate

和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體L-精(標準品） Ibuprofen

富半胱肝結(jié)合蛋白61抗體L-賴（標準品） Ibuprofen

2號染色體開放閱讀框65抗體L-酪(標準品) Enalapril Maleate

β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體L-亮(標準品) Enalapril Maleate

陽離子轉(zhuǎn)運調(diào)控樣蛋白1抗體L-羥脯(標準品) 5-Fluorouracil

DNA斷裂因子相似蛋白A抗體L-乳(標準品) 5-Fluorouracil

DNA斷裂因子相似蛋白B抗體L-色(標準品) Sumatriptan succinate  

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)