產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01X12066 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱(chēng) | RAF265 |
Anti-Tat/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rh
![]() |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線 ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2022-05-17 13:51:10瀏覽次數(shù):310
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01X12066 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱(chēng) | RAF265 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
RAF265 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
RAF265(CHIR-265)對(duì)C-Raf/B-Raf/B-Raf V600E有抑制性,IC50為3-60nM,對(duì)VEGFR2磷酸化的EC50為30nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):927880-90-8 別名:CHIR-265 純度:99.40% 分子量:518.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
骨成型蛋白10(BMP10)ELISA Kit英文名稱(chēng):BMP10 ELISA Kit前列環(huán)合成抗體包裝500g
谷胱甘肽過(guò)氧化1(GPX1)ELISA Kit英文名稱(chēng):GPX1 ELISA Kit軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體包裝5g
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移ω1(GSTω1)ELISA Kit英文名稱(chēng):GSTω1 ELISA KitT淋巴CD1A抗體包裝50MG
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移θ2(GSTθ2)ELISA Kit英文名稱(chēng):GSTθ2 ELISA Kit磷化周期B1抗體包裝25g
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移θ1(GSTθ1)ELISA Kit英文名稱(chēng):GSTθ1 ELISA Kit胞漿型磷脂A2抗體包裝5g
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移α4(GSTα4)ELISA Kit英文名稱(chēng):GSTα4 ELISA Kit膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體包裝1g
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移α1(GSTα1)ELISA Kit英文名稱(chēng):GSTα1 ELISA Kit緊密連接蛋白6抗體包裝100g
谷胱甘肽(GSH)ELISA Kit英文名稱(chēng):GSH ELISA Kit磷化緊密連接蛋白6抗體包裝25g
谷光甘肽合成(GSS)ELISA Kit英文名稱(chēng):GSS ELISA Kit著絲粒蛋白T抗體包裝5g
谷轉(zhuǎn)(ALT)ELISA Kit英文名稱(chēng):ALT ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白2抗體包裝1g
谷酰胺2(GLS2)ELISA Kit英文名稱(chēng):GLS2 ELISA Kit著絲粒蛋白P抗體包裝5g
谷酰胺(GLS)ELISA Kit英文名稱(chēng):GLS ELISA Kit分裂周期相關(guān)蛋白5抗體包裝250mg
谷酰胺合成(GS)ELISA Kit英文名稱(chēng):GS ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白2抗體包裝1g
谷脫羧2(GAD2)ELISA Kit英文名稱(chēng):GAD2 ELISA Kit周期調(diào)控因子10抗體包裝250mg
谷脫氫(GDH)ELISA Kit英文名稱(chēng):GDH ELISA Kit中心體蛋白97kDa抗體包裝100mg
辣椒Colletotrichum│capsici (Syd.) E.J. Butler & Bisby 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白L1試劑盒亞油酯;Methyl Linolea
白色類(lèi)諾卡氏菌Nocardioides│albus 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)載脂蛋白H試劑盒油酯;Methyl Oleate
假格里朗蒼白桿菌Ochrobactrum│pseudogrignonense 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白E試劑盒硬脂酯;Methyl Stearat
C-Raf/B-Raf/B-Raf V600E抑制劑(RAF265)突觸結(jié)合蛋白5抗體牛蒡子苷 ARCTIIN(P)Human, Mouse, Rat
磷化D酪激衰減蛋白1抗體熊果苷 ARBUTIN(P)Human, Mouse
可溶性附著蛋白α-SNAP抗體熊果苷 ARBUTIN(P)Human, Mouse, Rat
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體熊果苷 ARBUTIN(P)Human
線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體熊果苷 ARBUTIN(P)Human, Mouse
腫瘤抑制蛋白18抗體熊果苷 ARBUTIN(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白Sall1抗體1-二十烷 ARACHIDYL ALCOHOL(EICOSANOL)(SG)Human
鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白Sall4抗體1-二十烷 ARACHIDYL ALCOHOL(EICOSANOL)(SG)Human
轉(zhuǎn)錄因子SOX17抗體1-二十烷 ARACHIDYL ALCOHOL(EICOSANOL)(SG)Human