以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Fenofibrate是一種有效的CYP2C19和CYP2B6抑制劑,IC50分別為0.2μM和0.7μM。Fenofibrate也是PPARα激動劑,EC50為30μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:49562-28-9 純度:99.92% 分子量:360.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
白介8(IL-8/CXCL8)ELISA Kit英文名稱:IL-8/CXCL8 ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體包裝500g
白介8(IL-8)ELISA Kit英文名稱:IL-8 ELISA Kit凋亡誘導(dǎo)因子3抗體包裝100g
白介7(IL-7)ELISA Kit英文名稱:IL-7 ELISA Kit凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體包裝25g
白介6(IL-6)ELISA Kit英文名稱:IL-6 ELISA Kit凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體包裝500g
白介6(IL-6)ELISA Kit英文名稱:IL-6 ELISA Kit性神經(jīng)鞘磷脂抗體包裝1g
白介-5(IL-5)ELISA Kit英文名稱:IL-5 ELISA Kit腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運蛋白1抗體包裝5g
白介5(IL-5)ELISA Kit英文名稱:IL-5 ELISA Kit肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體包裝1g
白介4(IL-4)ELISA Kit英文名稱:IL-4 ELISA KitATPH+轉(zhuǎn)運溶體輔助蛋白2抗體包裝100g
白介4(IL-4)ELISA Kit英文名稱:IL-4 ELISA Kit肝結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺抗體包裝25g
白介35(IL-35)ELISA Kit英文名稱:IL-35 ELISA Kit核突觸蛋白抗體包裝100g
白介33(IL-33)ELISA Kit英文名稱:IL-33 ELISA Kitβ-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)包裝500g
白介31(IL-31)ELISA Kit英文名稱:IL-31 ELISA Kitβ淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體包裝1g
白介3(IL-3)ELISA Kit英文名稱:IL-3 ELISA Kitβ淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體包裝250mg
白介2受體β(IL2rb/CD122)ELISA Kit英文名稱:IL2rb/CD122 ELISA Kitβ淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體包裝1g
白介2受體(IL-2R)ELISA Kit英文名稱:IL-2R ELISA Kit激活受體2A抗體包裝250mg
膜粘連蛋白11抗體基質(zhì)金屬蛋白1(MMP1)J-147是一種廣譜神經(jīng)保護(hù)活性基酰肼化合物(EC50= 60-115nM)。
CYP2C19和CYP2B6抑制劑(Fenofibrate)水通道蛋白-2(抗原)磺嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗原磺嘧啶鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
組織因子途徑抑制劑磺嘧啶銀(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白12磺噻唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
表皮生長因子受體III型突變體抗原磺異噁唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
CD26抗原磺芐西林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
三磷腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原磺草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
心肌特異性肌鈣蛋白T灰黃霉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
β分泌(抗原)灰黃霉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat