以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
HDAC抑制劑(HDAC-IN-3) | HDAC-IN-3 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
HDAC-IN-3是組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑,詳細(xì)信息請(qǐng)參考WO/2008040934A1。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1018673-42-1 純度:99.52% 分子量:403.52 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
小鼠組蛋白脫乙?;?/span>4(HDAC4)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit
山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA檢測(cè)試劑盒GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T
犬胰蛋白酶原激活肽(TAP)免疫試劑盒 Canine ypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit
英文名稱Mouse8-hydroxy-2-deoxyguanosineELISAKit小鼠8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)規(guī)格:96T/48T
草莓*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
RatFractalkine/CX3CL1ELISA試劑盒大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素27(IL27)ELISA試劑盒 ,英文名: IL27 ELISA Kit
人促卵泡素(FSH)ELISA檢測(cè)試劑盒humanfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T
大鼠抗弓形蟲(chóng)IgG抗體免疫試劑盒 Rat ai-toxoplasmosis IgG Aibody ELISA kit
英文名稱RatC3aELISAKit大鼠補(bǔ)體片斷C3a(C3a)規(guī)格:96T/48T
酒類甲酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitHPV人狀瘤病毒抗體規(guī)格:48T/96T
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human activated protein C resistance (APCR) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA試劑盒
RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAO(HumanAcrineOrange)ELISAKit人吖啶橙規(guī)格:48T/96T
血栓素B2(TXB2)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
PorcineIerleukin1,IL-1ELISAKit豬白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HDAC抑制劑(HDAC-IN-3)SLC25A13 英文名稱: 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬酸/谷酸載體蛋白抗體 0.2ml
EPH receptor A4 英文名稱: 酪酸蛋白激酶A4抗體 0.1ml
腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 Anti-PEPT1 0.1ml
Anti-SSTR5/FITC 熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)抑素受體5(SSTR5)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MYPT1(Thr696) 磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體 規(guī)格 0.1ml
beta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg