以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
(S)-GNE-140是活性較小的GNE-140的對映體,能夠抑制乳酸脫氫酶A(LDHA)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:2003234-64-6 純度:97.79% 分子量:499.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白(MTTP)ELISA Kit英文名稱:MTTP ELISA Kit10號染色體開放閱讀框93抗體包裝1g
微精蛋白β(MSMβ)ELISA Kit英文名稱:MSMβ ELISA Kit10號染色體開放閱讀框63抗體包裝5g
微管關(guān)聯(lián)蛋白τ(MAPτ)ELISA Kit英文名稱:MAPτ ELISA Kit10號染色體開放閱讀框132抗體包裝1g
微管關(guān)聯(lián)蛋白2(MAP2)ELISA Kit英文名稱:MAP2 ELISA Kit10號染色體開放閱讀框30抗體包裝25g
微管關(guān)聯(lián)蛋白1A(MAP1A)ELISA Kit英文名稱:MAP1A ELISA Kit10號染色體開放閱讀框140抗體包裝5g
微管蛋白β1(TUBβ1)ELISA Kit英文名稱:TUBβ1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框125抗體包裝10MG
微管蛋白α3A(TUBα3A)ELISA Kit英文名稱:TUBα3A ELISA Kit1號染色體開放閱讀框129抗體包裝100g
網(wǎng)鈣蛋白2(RCN2)ELISA Kit英文名稱:RCN2 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框159抗體包裝25g
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)ELISA Kit英文名稱:AGER ELISA Kit1號染色體開放閱讀框163抗體包裝5g
晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)ELISA Kit英文名稱:AGE ELISA Kit1號染色體開放閱讀框172抗體包裝1g
外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)ELISA Kit英文名稱:PMP22 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框2抗體包裝250mg
外周蛋白(PRPH)ELISA Kit英文名稱:PRPH ELISA Kit1號染色體開放閱讀框19抗體包裝5g
唾液結(jié)合Ig樣凝集3(SIGLEC3)ELISA Kit英文名稱:SIGLEC3 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
拓?fù)洚悩?gòu)Ⅱ(TOP2)ELISA Kit英文名稱:TOP2 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框31抗體包裝25g
拓?fù)洚悩?gòu)Ⅰ()ELISA Kit英文名稱: ELISA Kit1號染色體開放閱讀框51抗體包裝5g
鼠尾菌Muricauda│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,USP30組織蛋白B試劑盒紫菫定酚;Corydine
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:> 99%組蛋白乙酰化試劑盒正十二烷巨大戟酯;Dodecanoic
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組蛋白脫乙?;?試劑盒澤蘭黃;6-Methoxyluteol
LDHA抑制劑((S)-GNE-140)碳酐9抗體細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)檢測試劑盒SOCS3 ELISA Kit
色P450 17抗體細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激2(ERK2)檢測試劑盒ERK2 ELISA Kit
色P450 7A1抗體/膽固7a羥化細(xì)胞外質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)檢測試劑盒MEPE ELISA Kit
膽固24羥化抗體細(xì)胞外質(zhì)蛋白1(ECM1)檢測試劑盒ECM1 ELISA Kit
腫瘤新因子1抗體P450家族成員7A1(CYP7A1)檢測試劑盒CYP7A1 ELISA Kit
膽固25α7羥化抗體P450家族成員3A4(CYP3A4)檢測試劑盒CYP3A4 ELISA Kit
角蛋白3+12抗體P450家族成員2E1(CYP2E1)檢測試劑盒CYP2E1 ELISA Kit
接頭蛋白CrkL抗體P450家族成員2B6(CYP2B6)檢測試劑盒CYP2B6 ELISA Kit
色P450 24A1抗體P450家族成員27B1(CYP27B1)檢測試劑盒CYP27B1 ELISA Kit